高效液相色谱法分析黄秋葵多糖的单糖组成

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1、高效液相色谱法分析黄秋葵多糖的单糖组成裘雅渔1李巧玲1程和勇2(1浙江大学化学系,浙江杭州310027;2杭州师范大学材料系,浙江杭州310058)摘要:采用高效液相(HPLC-RID)色谱法,建立了7种常见单糖的分离模式,并成功地用于黄秋葵多糖的单糖组成分析,具有良好的重复性。结果表明,黄秋葵多糖由木糖、甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、果糖、半乳糖及阿拉伯糖7种单糖组成,其摩尔比为0.57:1.00:0.53:3.50:1.75:1.25:1.70,该HPLC-RID方法是简单、快速、灵敏、方便的分析技术,可用于黄秋葵多糖的质量控制。关键词:黄秋葵多糖,单糖组成,高效液相色谱文章分类号:O65

2、。AnalysisofMonosaccharideCompositioninOkraPolysaccharidesbyHighPerformanceLiquidChromatographyQIUYa-yu1,LIQiao-ling1,CHENGHe-yong2(1DepartmentofChemistry,ZhejiangUniversity,Hangzhou,310027China;2DepartmentofMaterials,HangzhouNormalUniversity,Hangzhou,310058China)Abstract:Thehighperformanceliquidc

3、hromatographic(HPLC)methodof.wasdevelopedtoseparatethetraditionalsevenmonosaccharidesanddetectthemonosaccharidecompositionofOkrepolysaccharideswithgoodreproducibility.Inthisstudy,itwasfoundthatsulfuricacidandtrifluoroaceticacidpossessedthesameabilityforhydrolyzingOkrapolysaccharidesandthecomponen

4、tmonosaccharideswerecompletelyreleasedfromthepolysacchaidesuntilhydrolyzingfor8h.andthewholedryingprocessesoftheacidhydrolysatescouldbeomitted.TheresultsofHPLCanalysisshowedthatOkrapolysaccharidesconsistedofxylose,mannose,rhamnose,glucose,fructose,galactoseandarabonosewiththemolarratioof0.57:1.00

5、:0.53:3.50:1.75:1.25:1.70.TheHPLCmethodissimple,rapid,sensitive,convenientandcanbeappliedtothequalitycontrolofOkrapolysaccharides.Keywords:Okrapolysaccharides,monosaccharidecomposition,highperformanceliquidchromatography1引言黄秋葵多糖是从黄秋葵嫩荚果中提取的水溶性成分,药理学研究表明,嫩荚果中含有特殊香气和风味的粘滑汁液,这种粘滑汁液是由水溶性纤维果胶、半乳聚糖和阿拉伯

6、树胶等组成,具有神奇的功能,这种粘滑汁液即是粘蛋白[1],具有保护肠胃、肝脏和皮肤粘膜作用[2]。并有治疗胃炎、胃溃疡等疾病的效果[3];这种粘液蛋白还能刺激中枢神经,加速血液循环及促进新陈代谢和全身血管活化[4],可防治因血管供血不足造成的心脏病、中风、骨质疏松及老年痴呆等疾病[5]。而多糖的单糖组成测定是控制多糖质量标准和提供多糖基本信息的最重要环节[6~9]。因单糖存在互变异构体、差向异构体、结构相似等特征[10~12],而且往往同一待测样品,如多糖、寡糖、糖肽、糖蛋白等,可能含有许多类型的单糖[13,14]。所以,单糖分析有其自身的特点,必须具有高效的分离技术,方可实现系列单糖的

7、有效分离。本研究采用高效液相渗透色谱方法,用示差折光检测器和磺化的聚苯乙烯二乙烯基苯阳离子交换树脂(Pb2+)柱(交联度为6%),建立适于黄秋葵多糖单糖组成测定的HPLC新方法,达到灵敏、快速、准确、方便和可在线大批量分析的目标。2实验部分2.1仪器和试剂WATERS2690液相色谱仪(美国WATERS公司);PRE-PACKEDCOLUMNRTPOLYSPHERCHPB分析糖柱(德国MERCK公司);旋转蒸发仪(瑞士BUCHI公司

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