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《(色谱)高效液相色谱法分析生漆多糖中的单糖组成》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、第16卷第2期色谱Vol.16No.21998年3月CHINESEJOURNALOFCHROMATOGRAPHYMarch1998高效液相色谱法分析生漆多糖中的单糖组成杜予民王晓燕柳卫莉蒙缔亚(武汉大学环境科学系武昌430072)(湖北省农业科学院分析测试中心武昌430064)提要采用-BondapakNHTM2色谱柱,以乙腈∶水∶甲醇(70∶25∶5,V/V)为流动相,利用示差折光检测器的高效液相色谱法对湖北毛坝大木、毛坝小木和建始3种生漆中漆多糖的单糖组成成分进行了直接分离分析,方法简便、快速、重现性好,回收率在98.8%～103.
2、6%之间,相对标准偏差在5%以下。关键词高效液相色谱法,生漆,漆多糖分类号O6583.4%,2.3%和3.0%。1前言2.3色谱方法生漆多糖(LPS)是从我国特产资源生漆液中分样品配制(1)标准样:准确称取半乳糖、阿拉离得到的一种酸性杂多糖,其分子主链为(1→3)-伯糖、鼠李糖、木糖、葡萄糖醛酸内酯标样配制4组,D-半乳糖,并带有大量支链,在侧链末端为葡萄糖醛加入2.0mol/L三氟乙酸溶液3mL,100℃封管处理酸盐所构成[1],含量约占生漆液的3%。漆多糖是生8h,于45℃下在旋转蒸发器中减压浓缩并除去三氟漆显示超耐久性漆膜的主要成分
3、之一[2]。近来还发乙酸,用五氧化二磷真空干燥器干燥至恒重,加水定现它具有升白细胞、抗凝血和免疫抑制等多方面生容至1.0mL。(2)漆多糖完全酸水解产物制备:取漆物活性和功能[3];并且其生物活性与化学组成、分子多糖50mg,酸处理过程同(1),干燥后加水定容至量和糖醛酸含量有密切的关系[4]。关于漆多糖中单1.0mL。糖组分的测定一直未见报道。本实验室曾采用薄层回收率测定准确称取上述标准单糖配成色谱法、衍生化气相色谱法[5]对其单糖含量作过测1.0mL溶液,依次量取0.1,0.2,0.5mL分别加入3试,操作繁杂,测定准确度不高。采用示差
4、折光检测份毛坝大木漆多糖样品50mg中,干燥,按“样品配器、高效液相色谱标样法分析,对漆多糖完全水解液制”方法处理后,加水定容至1.0mL。TM进行直接分离分析,获得了满意的结果。样品测定用-BondapakNH2色谱柱和示差折光检测器(25℃水浴恒温),以乙腈∶水∶甲醇(702实验部分∶25∶5,V/V)作流动相,流速1.6mL/min,进样量20L,与标准样对照,按保留时间和峰面积分别进行2.1仪器和试剂定性、定量分析。LC-6A高效液相色谱、C-R3A数据处理机(日本2.4葡萄糖醛酸的测定岛津),RI-3示差折光检测器(Varia
5、n),G-501型高压按照文献[6]的比色法进行。六通进样阀(上海原子核研究所仪器厂),UV-160紫外-可见分光光度仪(日本岛津),Micro-PAKNH2-103结果与讨论(300mm×4.6mmi.d.,10m)色谱柱(Varian),-BondapakNHTM3.1漆多糖各组分的分离定性与精密度2(300mm×7.8mmi.d.,10m)色谱柱(Waters)。各单糖标样均为Sigma试剂,乙腈、甲实验采用(1)Micro-PAKNH2-10柱与乙腈-水、醇、三氟乙酸均为分析纯,使用二次蒸馏水。(2)Micro-PAKNH2-
6、10柱与乙腈-水-甲醇、(3)-BondapakNHTM2.2漆多糖的提取与纯化2柱与乙腈-水-甲醇等3种分离条件生漆试样为湖北毛坝大木和小木漆树液以及湖分别分离漆多糖中的5种单糖。结果表明,第3种分北建始漆树液共3种(1995年产,由武汉市国漆厂提离条件能使漆多糖各组分得到较好的分离(见图1-供)。漆多糖的提取与纯化,按文献[1]方法进行。毛b)。在条件实验中发现:(1)在流动相中加入甲醇可坝大木、小木和建始漆中的漆多糖含量分别为以有效地稳定基线,减小基线噪音;(2)单糖保留时国家自然科学基金资助课题本文收稿日期:1996-12-14
7、,修回日期:1997-02-17·174·色谱16卷间随流动相中乙腈量的增加而延长,最后选定流动表1保留时间及精密度相的配比乙腈∶水∶甲醇为70∶25∶5(V/V)。采用Table1Retentiontimeandaccuracy葡萄糖醛酸内酯鼠李糖木糖阿拉伯糖半乳糖外标法对漆多糖中的5种单糖定性,它们的保留时GlucuroneRhamnoseXyloseArabinoseGalactose间基本与标样的保留时间一致(见表1),其中鼠李糖tRofLPS(min)9.99311.54412.47014.09816.958和木糖偏差较大。为进一
8、步定性验证,我们还采用文tRofsample(min)9.89311.68212.62214.07517.056献[5]的方法将单糖标样和漆多糖水解产物制成乙RSD(%)0.27
