玫瑰孢链霉菌产达托霉素发酵工艺的研究

《玫瑰孢链霉菌产达托霉素发酵工艺的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、MUdies0ndaDtomVClnIermentatiOnDV·)彻ZD朋巡垂鳖--IJn●■■■●■●-Author’Ssignature：一‘■‘Supervisor7Ssignature：ExtemalReviewers：办沁帆否oExaminingCommitteeChairperson：ExaminingCommitteeMembers：Dateoforaldefence：浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其

2、他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得．逝姿盘鲎或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逝姿盘堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权逝婆盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：导师签名：签字日期

3、：年月日签字日期：年月日致谢在两年半的硕士生活即将结束之时，在此我向所有关心帮助过我的老师、同学、朋友表示感谢，若不是你们的支持，我恐怕难以前行至此，请在此接受我最最诚挚的谢意!本论文是在导师金志华教授的悉心指导下完成的。两年多来，金老师渊博的专业知识、创新的科研思维、严谨求是的治学态度、对事业孜孜不倦的追求精神和谦逊宽厚的品格使我受益匪浅。本论文的研究工作主要是在浙江大学宁波理工学院完成的，这期间，金老师对我的研究工作进行了总体的指导，并提出了许多宝贵的建议，使我的研究视野得以开阔，更耳濡目染了他热忱谦和的人格。同时金老师在我的生活上也

4、给予了很多的关心和照顾。恩师的鼓励和引导是我得以完成学业的根本，在此，谨向金老师表示我崇高的敬意和由衷的感谢!同时感谢浙大宁波理工学院的张丽靖、金庆超以及胡升老师对本论文的研究工作给予了大力的关心、指导和帮助，还有李宁慧和徐晓红等老师在我实验过程中对我的关心与帮助。祝愿他们工作顺利、前程似锦!还要感谢尹华立、洪小伟、郑喜、黄柯、杨岳微等师兄姐妹及李达、姜玉娇、范士敏等同窗好友对我实验的建议与帮助，祝愿他们今后一切顺利。浙大宁波理工2007级本科生蒋姹姹、吴秉钢等同学也参加了本论文的部分工作，在此一并谢过!特别感谢我的父母亲、哥哥及姐姐等所

5、有家人在物质上给予我的支持，以及精神上对我的关怀与鼓励，是他们无私的爱才使我全身心投入学习中，在此祝愿他们身体健康、永远快乐!最后，向百忙之中抽时间对本文进行审阅、评议和参加论文答辩的各位老师表示由衷的敬意!何美儒二零一二年一月于求是园摘要本论文采用单因素法、正交试验法以及响应面法对达托霉素发酵条件及发酵培养基进行了优化，同时考察了补加葡萄糖以及氨基酸对达托霉素发酵的影响，结果如下：建立了测定发酵液中达托霉素含量的反相HPLC方法，色谱分析条件为：HypersilODS2(4．6mm×250mm，50m)；流动相为含O．1％2氟乙酸的乙腈

6、／含O．1％三氟乙酸的超纯水(45／55，v／v)；流速为1．0ml／min；进样量为20山；检测波长为220nln。以玫瑰孢链霉菌Hll为达托霉素生产菌，通过摇瓶单因素试验法对达托霉素发酵条件进行了优化，确定了最佳发酵条件为：接种龄42h，接种量2％，装液量25ml，温度28。C，初始pH7．5。通过正交试验法优化了达托霉素发酵培养基，在此优化的培养基及条件下，达托霉素的产量提高了107．99％。利用PB设计、最陡爬坡实验、CCD实验相结合的统计学方法对影响达托霉素发酵的培养基组分及主要外在条件进行了进一步的优化和评价，确定了达托霉素摇

7、瓶最佳发酵条件，达托霉素产量的预测值为184．67mg／L。发酵验证试验测得达托霉素的产量为191．99mg／L，-9优化前相比达托霉素产量提高了2．25倍，表明此方法对于优化达托霉素发酵条件是一种可行、有效的方法。在摇瓶及2．5L发酵罐中研究了补加葡萄糖对达托霉素发酵的影响。摇瓶发酵结果表明：初始葡萄糖为40g／L时最佳；在对数生长期后期补加20g／L的葡萄糖，达托霉素产量提高了39．77％；在对数生长期和稳定期分4次共补加20g／L的葡萄糖，达托霉素产量提高了62．06％。2．5L发酵罐补料分批发酵结果表明，从发酵12h开始共流加30

8、g／L葡萄糖，不仅有效地延长了抗生素的合成期，而且提高了菌体合成抗生素的能力，最终使达托霉素的产量比分批发酵提高了1．39倍。研究了补加氨基酸对达托霉素发酵的影响，结果表明：L．Trp及L—A