紫甘薯中花青素的提取及含量的测定

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1、紫甘薯中花青素的提取及含量的测定山东农业大学化学学院09级材化2班赵林静15275387782山东农业大学化学学院09级材化2班李新15254812978摘要用乙醇酸溶液从紫甘薯中提取花青素。用PH示差法对提取液中花青素含量进行测定。关键字：紫甘薯花青素PH示差法1前言：花青素又称花色素，是一种广泛存在于植物中的水溶性天然色素。属黄酮类化合物，多以糖苷的形式存在，也称花色苷。花色苷是一种以黄酮核为基础的一类糖苷，天然花色苷配糖体的基本结构为3、5、7-三羟基-2-苯基并呋喃。最早且最丰富的花青素的花青素是从后

2、葡萄渣中提取的葡萄皮红，花青素作为一种天然食用色素，安全，无毒，资源丰富，而且具有一定的营养和药用价值，在视屏、化妆、医药等方面有着巨大的应用潜力。有实验证明，花青素是迄今为止所发展的最强效的自由基清除剂。目前对花青素的定量没有较好的方法，常用的方法是以色价或吸光度表示其相对含量，也有用花青素纯品配置不同浓度梯度制作标准曲线测定色素的含量但由于花青素的标准品很不稳定，限制了这种方法的使用。本实验用PH示差法对紫甘薯中花青素的提取液中花青素的含量进行测定。2实验目的2.1掌握花青素的提取方法及其PH示差法测量花

3、青素含量的原理2.2熟练掌握分离提纯操作方法步骤。3实验原理紫甘薯中含有花青素，用乙醇的酸溶液作为提取液在离心机的作用下即可得到粗的花青素提取液。PH示差法的原理为花青素的色调和色度随PH值的不同而发生改变。PH为1.0时，花青素以红色的2-苯基并呋喃的形式存在。结合朗伯比尔定律可得出在两个不同PH值下，花青素溶液的吸光度差值与花青素含量成正比。4实验仪器及试剂仪器：电子天平；钥匙；精密PH试纸；PH计；表面皿、玻璃棒；烧杯；干燥的带塞子的锥形瓶250ml(4支)；100ml容量瓶（4支）；胶头滴管；500m

4、l试剂瓶（3支）；高速离心机、离心管（6支）；分光光度计；10ml小量筒（3支）；摇床；烧杯3支试剂：粉末状紫甘薯30g(自备)；分析纯的乙醇试剂500ml氯化钾20g醋酸钠30g去离子水1000ml分析纯的盐酸50ml5实验步骤5.1乙醇的酸溶液按85：15的比例将分析纯的乙醇溶液与去离子水混合，再用浓盐酸调节PH至1.0左右。5.2缓冲溶液的配制pH1.0的缓冲液准确称取7.45gkcl用蒸馏水定容至500ml。准确称取8.5ml分析纯的盐酸用蒸馏水定容至500ml,配成0.2mol/lHCL溶液。将KC

5、L溶液与HCL溶液以25：:67的比例混合，用KCL溶液调PH（0.9~~1.1）pH4.5的缓冲液准确称取16.4gNaAc用蒸馏水定容至500ML，用盐酸调PH（4.4~~4.6）5.3花青素的提取1.准确称取三份约5g的紫甘薯干粉于三个干燥的带塞子的250ML锥形瓶中2.分别向三个锥形瓶中加入100ML乙醇的酸溶液，摇匀。在摇床上振荡20min。3.依次将三个锥形瓶中的混合液在高速离心机下离心（10000r/min,5min）.4.取上清液分别转移至三个干净的锥形瓶中。5.得到粗的花青素的提取液。5.4

6、PH示差法测定花青素的含量1.分别移取1号锥形瓶中的10ML试样两份，置于两个100ML容量瓶中。2.分别用PH1.0，PH4.5的缓冲液定容至100ML。3.达平衡后约80分钟，在525nm和700nm波长下分别测定两溶液的吸光值。4.对2,3号锥形瓶中的提取液进行如上操作。6．实验记录及数据处一号测定波长PH525nm700nmPH=1PH=4.5二号测定波长PH525nm700nmPH=1PH=4.5三号测定波长PH525nm700nmPH=1PH=4.5A=(A525nm-A700nm)PH1.0-(

7、A525nm-A700nm)PH4.5花青素的含量C(mg/100g)=(A*MW*DF*V)*100/(ε*L*Wt)A吸光度ε-矢车菊花素-3-葡萄糖苷的消光系数，26900DF稀释因子MW-矢车菊花素-3-葡萄糖苷的449.2V-最终体积，mlL–光程，1cm7费用计算50元参考文献杨兆艳PH示差法测定桑葚红色素中花青素含量的研究刘学铭高色价桑葚红色素的研制及其质量控制研究王日为茶叶中花青素类物质研究展望宋阳成蓝莓类饮料中花青素的快速检测方法