同种异体脂肪源性间充质干细胞复合β-磷酸三钙支架修复兔桡骨大段骨缺损的实验分析

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1、万方数据复旦大学硕士学位论文中文摘要第三部分应用rADSCs／B-TCP骨组织工程复合体修复兔桡骨大段骨缺损的实验研究目的：以B—TCP陶瓷为支架材料，复合兔脂肪源性问充质干细胞，探讨构建组织工程骨修复骨缺损的可行性。方法：体外培养的兔脂肪源性间充质干细胞(rADSCs)接种于B～TCP支架上，构建rADSCs／B—TCP骨组织工程复合体，并进行体外培养。制备兔桡骨2cm长度的节段性骨缺损模型，分三组进行骨缺损治疗的研究：空白对照组(A组)不植入任何材料，单B-TCP人工骨对照组(B组)，rADSCs／B-TCP复合体实验组(C组)。

2、各组8只兔16例骨缺损。在手术后2周，4周，6周和8周时进行X线检查，按Lane—SandhuX线评分法对骨愈合情况进行比较，x线检查后每组各选2只兔处死后取出标本，对标本进行大体观察以及进行常规HE染色，光镜下观察骨修复情况，并观察是否发生免疫排斥反应。结果：通过Lane—Sandhux线评分进行统计学分析，c组比B组在各时间点评分均略高，但其差异无统计学意义，其两组的评分均明显高于A组，手术后8周结果示A组与其它两组间差异均有统计学意义。组织学观察C组在术后4周可观察到骨缺损周围开始形成新生骨，并随着时间的延长新生骨量逐渐增多，在

3、术后6周时，材料逐渐降解，材料孔隙内有新生骨长入，在术后8周时，材料降解明显，材料孔隙基本消失，髓腔已基本再通。而至术后8周，2例B组及4例A组骨缺损未愈合，髓腔不通，与实验组有明显差异。组织学检测未见免疫排斥现象。结论：将同种异体脂肪源性问充质干细胞为种子细胞，接种于B—TCP支架材料构建骨组织工程复合体，移植修复兔桡骨大段骨缺损部位。术后8周骨缺损部位完全修复，髓腔再通及塑形基本完成。组织学检测未见免疫排斥现象；ADSCs有望成为理想的修复骨缺损、促进骨折愈合的组织工程骨所需要的种子细胞，为大段骨缺损组织工程的修复提供可行的技术方

4、案，为临床治疗骨缺损提供新的方法。关键词：脂肪源性问充质干细胞；骨组织工程复合体；大段骨缺损；B一磷酸三钙。中图分类号：R3183万方数据复旦大学硕士学位论文AbsrtractAbstractPart1：Thestudyoninvestigationtoisolate，cultureandidentifyrabbitadipose—derivedmesenchymalstemcellsanditsabilitytodifferentiateinto1ipocytesandosteoblastsinvitroObjective：Esta

5、blishthemethodtoisolateandculturerabbitadipose—derivedmesenchymalstemeells(rADSCs)invitro，inordertostudytheirmorphology，cellsurfacemarkersandbiologicalproperties．ToinvestigatethemethodofrADSCsdifferentiateinto1ipocytesandosteoblastsinvitro．Methods：PrimaryrADSCswereisola

6、tedfromthesubcutaneousadiposetissueofposteriorcervicalregionfromNewZealandwhiterabbitsby0．1％collagenaseIdigestion．TherADSCswerepassagedandamplifledbythetrypsindigestion．ThefourthpassageofrADSCswasinducedtodifferentiateafterexposuretoadipogenicorosteogenicmedium．TheOi1Re

7、d0staining，alkalinephosphatase(ALP)andA1izarinredstainingwereusedtodetecttheresults．ThegrowthcurveofthefourthpassageofrADSCswasdrawnbyopticaldensityvalue(ODvalue)usingtheCCK一8method．CellsurfacemarkersCD29，CD34，CD44，CD45andCD90wereexaminedusingflowcytometry．Results：TherA

8、DSCsisolatedfromthesubcutaneousadiposetissueofrabbitshadastrongcapahilityofproliferationwithafusiformadherentg