慢病毒介导的mir-16对人脑胶质瘤细胞生物学特性影响的研究

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1、万方数据论文题目：堡痘重企昱的盟iB：!鱼过厶脑膣亟擅细胞生物堂挂性量响的硒究答辩委员会主席：王菡徨答辩委员会成员：诸蔓启剑郑焦明论文答辩日期：2QL地量!』8万方数据温州医科大学硕士学位论文目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2ABSTRACT········································································4英文缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8结果··············································································19讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32一j、结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43综述参考文献⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52万方数据温州医科大学硕士学位论文慢病毒介导的miR．16对人脑胶质瘤细胞生物学特性影响的研究中文摘要目的：研究慢病毒介导的miR．16对人脑胶质瘤细胞生物学特性的影响，并探讨其可能的机制。通过对miR．16生物学功能及作用靶点的研究，不仅可以作为新的生物学标准为人脑胶质瘤的早期发现及预后提供预测，更有希望作为新的靶向药物应用于临床中，为胶质瘤的治疗提供新的手段。方法：首先通过实时荧光定量PCR检测miR．16在人正常脑组织与人脑胶质瘤细胞中的表达情况；实验

4、将细胞分为三组：正常对照组(CON)、阴性对照组(NC)、过表达组(OE)，用构建好的miR．16过表达的慢病毒载体和阴性对照慢病毒载体分别感染人脑胶质瘤U87细胞中的过表达组(OE)和阴性对照组(NC)，根据荧光表达量来判断感染效率；实时荧光定量PCR检测miR一16在各组U87细胞中的表达，检测P14ARF、Wipl、Bcl2、CyclinDl相关目的基因表达的变化；流式细胞术检测细胞周期变化；DAPI染色法观察胶质瘤细胞核异型性及细胞凋亡的形态学改变；流式细胞术检测细胞凋亡情况：划痕迁移实验检测细胞迁移能力，Transwell小室法检测细胞侵袭能力；CC

5、K-8法、克隆形成法检测细胞增殖能力；Westernblot法检测相关目的蛋白P14ARF、Wipl、Bcl2、CyclinDl表达的变化。结果：miR一16在人正常脑组织中的表达水平明显高于与人脑胶质瘤细胞；慢病毒可成功感染U87细胞，效率均大于90％。在三组U87细胞中，实时荧光定量PCR结果显示，OE组miR．16表达水平与CON组、NC组相比明显上调，差异具有统计学意义(P

6、ipl、Bcl2、CyclinDl基因表达水平下调，差异均具有统计学意义(P

7、，相比无明显差异，OE组早期凋亡率增高，差异具有统计学意义(P

8、毒可成功介导miR．16在人脑胶质瘤细