csnk2b在肝癌中表达变化及其与肝癌发生和迁移关系探索

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1、万方数据指导小组成员余龙复旦大学遗传所教授江松敏复旦大学遗传所副教授杨鲜梅复旦大学遗传所副教授万方数据复旦大学硕士学位论文CSn(愆B在肝癌中的表达变化目录1111IIIIIII1111IIIY2702516缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。。1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．2Abstract⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。4前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8一、材料与试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．8二、主要的仪器设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11三、生物信息学途径和计算机分析软件包⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．12四、实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．17一、CSNK2BmRNA水

3、平在肝癌组织中较之癌旁组织有显著性上调⋯⋯⋯17二、CSNK2BmRNA在肝癌组织中上调与肝癌临床病理学特征的关联分析18三、CSNK2B在肝癌组织中的分布和表达情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．19四、CSNK2B在肝癌组织中的上调表达与肝癌临床病理学资料相关性分析20五、CSNK2B的siRNA小片段的有效性检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22六、siRNA消减CSNK2B表达抑制细胞的生长⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24七、siRNA敲减CSNK2B表达抑制细胞克隆形成的大小和密度⋯⋯⋯⋯⋯一25

4、八、敲减CSNK2B表达减弱细胞株迁移和侵袭能力⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．26九、敲减CSNK2B的表达丰度下调影响细胞周期蛋cyclinBl的表达⋯⋯．27十、敲减CSNK2B的表达丰度能够增强肝癌细胞对抗肿瘤药物的敏感性⋯．27讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．：；()参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32论文小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33文献综述：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．34参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．53万方数据笙呈盔兰堡主堂垡笙銮垡翌!坠丝垄壁堕±堕壅塑些FBSPAGEPBSPCRCDNAmRNAbpKDESTRT．PCRsiRNACCK．8GFPHCCWBCK2缩略词表FetalBovineSerumPolypropyleneAcylGelElectrophoresisPhosp

6、hate．BufferedSalinePolymeraseChainReactionComplementaryDNAMessengerRNABasePairKilodaltonExpressedSequenceTagRealTime．PolymeraseChainReactionSmallinterferingRNACellcountingkit-8GreenfluomscentproteinHepatocellularcarcinomaWesternblotCaseinkinase2万方数据复旦大

7、学硕士学位论文CSNK2B在肝癌中的表达变化及其与肝癌的发生和迁移的关系探索中文摘要研究背景与目的：蛋白激酶CK2曾经被称为酪蛋白激酶II，是一种在真核细胞中普遍存在的信使非依赖性丝／苏氨酸蛋白激酶，高度保守且功能多样。近些年对CK2的研究取得了重大的进展，其参与了许多调控细胞增殖和凋亡的途径[1]。主要集中在头颈癌，前列腺癌，乳腺癌，肺癌的研究中[2，4，8，9】。大量实验表明，以非全酶形式存在的CK2各亚基具有各自独特的生物学功能[2，5]。CSNK2B亚基不仅是催化亚基a或a’的特异配体，更可

8、以以游离方式存在，行使生物学功能[3]。本文通过检测肝癌中的CK2的调节亚基CSNK2B的表达水平，探讨CSNK2B的表达水平与临床病理的关系。并应用RNA干扰技术敲减肝癌细胞7721中的CSNK2B亚基，探讨下调CSNK2B对肝癌细胞生长增殖和迁移的影响。我们就CSNK2B是否影响抗肿瘤药物对肝癌细胞的敏感性做了初步了研究，探索性的检测了消减CSNK2B后检测细胞对10种抗肿瘤药物耐药性是否有所改变。方法：通过realtime-PCR检测30例肝癌及癌旁样本及100