免疫性血小板减少症t细胞亚群及t细胞受体的研究

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1、广州医学院硕士学位论文免疫性血小板减少症T细胞亚群及T细胞受体的研究姓名：张小冬申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：20070510中英文缩写对照ITPImunneThrombocytopenia免疫性血小板减少症TCRTCellReceptorrpmRationPerMinuteFCMFlowCytometryRT-PCRReverseTranscriptionPolymeraseChainReaction逆转录-聚合酶链反应CDR3ComplementarityDeterminingRegion3互补决定区3ILInterleukin白细胞介素IFN-γInterferon-g

2、ammaγ干扰素TNF肿瘤坏死因子MNCMononuclearCell单个核细胞CTL（Tc）细胞毒性T细胞Th辅助T细胞EDTA乙二酸四乙胺免疫性血小板减少症的T细胞调控机制的研究学位申请人：张小冬导师：中文摘要研究背景免疫性血小板减少症（ImmuneThrombocytopenia，ITP）是一种自身免疫性疾病，患者的免疫功能低下，以往认为，其发病机制主要是B细胞介导的体液免疫。但近年来越来越多的研究表明，T细胞免疫机制异常在其发病和进展中有重++要作用。根据细胞是否表达CD4或CD8分子，T细胞可分为CD4T细胞和CD8T细胞，它们各自分化的效应细胞不同，发挥不同的免疫效应。在正

3、常情况下，++CD4/CD8比例恒定，以维持正常的细胞免疫机制。而ITP患者由于细胞免疫异常，++常出现CD4/CD8比值失衡和功能紊乱。因此，分析T细胞亚群及所分化的效应细胞所分泌的细胞因子，可以了解到T细胞的免疫功能状态。T细胞（抗原）受体（TCellReceptor，TCR）是所有T细胞的特征性标志，其作用是识别抗原。根据所含肽链的不同，TCR可分为TCRαβ和TCRγδ两种类型，体内大多数T细胞表达为TCRαβ，称αβT细胞。所有T细胞表面均表达CD3分子，TCR则与CD3分子以非共价键结合，形成TCR-CD3复合物。近年来国内外均认为，利用基因扫描（Genescan）技术检测

4、CDR3长度差别以确定T细胞克隆性是目前较为理想的检测T细胞克隆性增殖和同时了解TCRVαβ各家族表达情况的方法，该法具有敏感、精确、客观等特点。为了了解ITP患者的T细胞免疫功能状态，探讨T细胞免疫异常在ITP的发生、发展、预后的关系，本研究分析了ITP患者外周血T细胞亚群及其所分化的效应细胞所分泌的细胞因子的的情况，以及7例ITP患者治疗前后外周血TCRVα、Vβ的表达和克隆特点。研究内容与方法应用流式细胞仪（FlowCytometry，FCM）法检测ITP患者及正常对照组外周血T细胞亚群及其所分化的效应细胞所分泌的细胞因子的特点，用统计软件SPSS进行统计分析；用RT-PCR-G

5、enescan技术分析ITP患者治疗前后以及正常对照组T细胞受体的表达和克隆特点。结果1、ITP患者免疫功能低下，存在T细胞的功能紊乱，本研究中的33例ITP+++患者CD4T细胞的百分比下降，CD8T细胞的比值上升，与正常对照组比较有统+++计学差异，而CD3T细胞以及CD4/CD8细胞的比值无显著差异。77例ITP患者IFN-γ、IL-2水平均较正常对照组上升，与正常对照组比较有统计学意义，两者之间的比值无显著差异。2、24例免疫性血小板减少症患者分别表达0-25个TCRVα亚家族、0-24个TCRVβ亚家族。24例病人均存在1个或以上的Vα和、Vβ亚家族的克隆增殖T细胞，增殖形式

6、包括寡克隆、寡克隆增殖趋势及双克隆。其中7例ITP患者治疗后T细胞亚家族的表达与克隆部分有所改善。结论1、免疫性血小板减少症患者免疫功能紊乱，出现T细胞免疫功能缺陷，T细胞亚群及其所分化的效应细胞所分泌的细胞因子发生变化。2、免疫性血小板减少症患者的T细胞亚家族存在倾斜性分布和克隆性增殖，部分患者治疗后这一情况可改善，提示ITP患者亚家族的这一特点与ITP的T细胞调节的发病机制有关，相关治疗方法可以部分纠正。关键词免疫性血小板减少症（ITP）;T细胞亚群；T细胞受体（TCR）；T细胞克隆性TheResearchofTCellsImmuneRegulationMechanismforPa

7、thogenesisinImmuneThrombocytopeniaAbstractBackgroudImmuneThrombocytopeniaisanautoimmunedisease,theImmunefunctionofpatientsislow.thatprevious,itspathogenesisismainlyBcellshumoralImmunemediated.Butinrecentyears,moreandmoreofth