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1、第21卷2期中国病毒学21（2）：121-1252006年3月VIROLOGICASINICAMarch2006*人诺如病毒衣壳蛋白的密码子优化及在昆虫细胞中的表达1111**21郭丽，周红莉，屈建国，王健伟，徐樨巍，洪涛（1.中国疾病预防控制中心病毒病预防控制研究所，北京100052;2.北京儿童医院，北京100045）CodonOptimizationandExpressionofNorovirusCapsidProteinsinInsectCells1111**21GUOLi，ZHOUHong-li，QUJian-guo，WANGJian-wei，
2、XUXi-wei，HUNGTao(1.NationalInstituteforViralDiseaseControlandPrevention,ChinaCDC,Beijing100052,China;2.BeiJingChildren’sHospital,Beijing100045,China)Abstract：NorovirusiscurrentlythepredominanthumancalicivirusthatcausesdiarrheainChina.Amongthedocumentednoroviruses,types4,1and3aret
3、heleadinggeneticsgroups.Inordertoimprovetheexpressionofthenoroviruscapsid,were-designedandartificiallysynthesizedthefull-lengthnoroviruscapsidgenesbyadoptingthecodonspreferentiallyusedininsectcellswithoutanychangingoftheaminoacidsequences.ThecodonoptimizedcapsidgenesofNorovirusGG
4、II1,GGII3,GGII4andGGII7wererespectivelyexpressedininsectcellSf9usingbaculovirusvector.Theresultsshowedthat,comparedtothewildtype,theexpressionlevelsoftheoptimizedgeneswereremarkablyincreased.Theassemblyofnorovirus-likeparticleswasobservedintheSf9cellsinfectedwiththerecombinantbac
5、ulovirusexpressingthecapsidprotein.Therecombinantcapsidexpressionpeakedat72hpostinfectionoftherecombinantbaculoviruses.Theresultsobtainedinthepresentworkwilllayafoundationforthedevelopmentoftheimmunologicaldiagnosticreagentsaswellasvaccinesforhumancaliciviruses.Keywords:Norovirus
6、;Capsid;Virus-likeparticle;Expression;Codonoptimization摘要：诺如病毒是当前在中国引起腹泻的主要人类杯状病毒，其中GGII4、GGII1和GGII3等为主要的流行遗传型。为了提高诺如病毒衣壳蛋白的表达量，我们将其编码基因按杆状病毒喜用密码子进行了优化设计和人工合成。以杆状病毒为载体，在昆虫细胞Sf9中对密码子优化后的诺如病毒GGII1、GGII3、GGII4和GGII7型衣壳蛋白基因进行了表达。结果显示，与野生型基因相比，经过密码子优化的基因在昆虫细胞中的表达水平得到明显提高，并可装配成病毒样颗粒。重
7、组杆状病毒感染Sf9细胞72h表达量达到高峰。这些结果的取得，为我国人杯状病毒免疫学检测试剂和疫苗的开发打下了基础。关键词：诺如病毒；衣壳蛋白；杆状病毒载体；表达；病毒样颗粒中图分类号:R373文献标识码:A文章编号:1003-5125(2006)02-0121-05[2,3]人类杯状病毒是引起急性非细菌性胃肠炎的后两种属于人类杯状病毒。诺如病毒有3个遗重要病原，主要通过污染的食物、水源或人－人接传型（Geneticgroup,GG）：GGI,GGII和GGIII，[1]触引起人的感染。目前已知杯状病毒科主要分为4札如病毒有4个遗传型：SGI,SGII,
8、SGIII和SGIV，个属：兔病毒（Lagovirus）,囊泡病毒（Vesivi
