abra在大鼠中枢神经系统中的表达及其对神经元突起生长作用的初步研究

《abra在大鼠中枢神经系统中的表达及其对神经元突起生长作用的初步研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、万方数据中图分类号墼至2：墨!UDC612博士学位论文学校代码!Q5兰三密级公珏ABRA在大鼠中枢神经系统中的表达及其对神经元突起生长作用的初步研究ApreliminarystudyontheexpressionofABRAinthecentralnervoussystemanditseffectsonthegrowthofneuronalprocessesinrats作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：副指导教师：刘丽华基础医学人体解剖与组织胚胎学基础医学院蔡维君邓盘月中南大学二零一四年五月答辩委员会主≤纽学位论文原创性声明掣粼掣

2、㈣万方数据，本人郑重声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特另tlDw以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均己在论文中作了明确的说明。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。作者签名：宴至聋日期：边!生年￡月三Z日学位论文版权使用授权书本学位论文作者和指导教师完全了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定：即学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复

3、印件和电子版；本人允许本学位论文被查阅和借阅；学校可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其它手段保存和汇编本学位论文。保密论文待解密后适应本声明。作者签名：j銎至釜一导师签名壅坚整日期：!)华年』月莩17t日期：尘生年』月车日万方数据ABRA在大鼠中枢神经系统中的表达及其对神经元突起生长作用的初步研究摘要第一部分ABRA在大鼠中枢神经系统的分布及定位1目的：观察肌动蛋白结合蛋白ABRA(actin．bindingrho．activatingprotein)在成年大鼠大脑皮质、海马区、基底节区、小脑、脊髓的表达。探讨

4、这种新发现的肌动蛋白结合蛋白在中枢神经系统中的可能作用及意义。方法：制备成年大鼠大脑皮质、海马区、基底节区、小脑、脊髓的冰冻切片，采用共聚焦免疫荧光组织化学技术检测ABRA在大鼠大脑皮质、海马区、基底节区、小脑、脊髓的表达定位。分别采用RT-PCR、westernblot检测海马中ABRAmRNA及ABRA蛋白水平的表达。结果：(1)ABRA表达在大鼠中枢神经系统神经元的胞核、胞浆和突起，其中胞核着色最强；(2)在大脑皮质，ABRA阳性神经元胞体和突起广泛分布于皮质的分子层、外颗粒层、外锥体细胞层、内颗粒层、内锥体细胞层、多形细胞层：(3)在海马区，A

5、BRA均匀分布于海马各部，阳性神经元集中于锥体细胞层，而其阳性突起弥散分布于海马分子层和多形层；(4)在基底节区，ABRA阳性产物广泛表达于神经元胞体和突起；(5)在小脑，ABRA阳性神经元胞体分布于浦肯野细胞层及颗粒层，其阳性突起分布于分子层；(6)在脊髓，ABRA阳性产物表达在整个灰质和白质；(7)ABRA与F．actin免疫荧光共定位研究显示ABRA与F．actin在神经元的胞浆和突起共定位。但在海马区，ABRA与F．actin仅在神经元的突起共定位，在神经元胞体没有共定位。(8)RT-PCR与westernblot检测到海马中分别有ABRAmR

6、NA和蛋白的表达。结论：我们的实验首次证实了ABRA在大鼠大脑皮质、海马区、本研究得到国家自然科学基金(编号：81370248)、中南大学升华学者计划项目资助I万方数据基底节区、小脑、脊髓有广泛表达，提示ABRA可能在大鼠这些部位的神经细胞功能活动方面起重要作用。第二部分ABRA在不同年龄阶段大鼠大脑皮质、海马、脊髓中的表达变化目的：检测ABRA在不同年龄阶段大鼠大脑皮质、海马、脊髓中的表达变化，从而探讨ABRA在中枢神经系统发育过程中的可能作用及意义。方法：不同年龄阶段正常SD大鼠36只，雄雌各半，新生鼠(生后7天，n=12)、成年鼠(6月龄，n=1

7、2)、老年鼠(20月龄，n=12)。采用westernblot定量检测不同年龄阶段大鼠大脑皮质、海马、脊髓中ABRA蛋白水平表达变化以及采用免疫荧光组织化学染色检测上述部位ABRA细胞定位。结果：(1)不同年龄阶段大鼠大脑皮质和海马中均检测到ABRA的表达，在新生期，ABRA蛋白水平表达较高，主要表达在胞浆和胞核；成年期，ABRA蛋白水平较新生期下降，除在胞浆与胞核内表达外，在细胞的突起也有强表达；在老年期，ABRA蛋白及表达ABRA的细胞均显著下降。(2)不同年龄阶段大鼠脊髓中均检测到ABRA的表达。Westernblot显示ABRA在新生鼠脊髓中表

8、达显著高于成年鼠及老年鼠。免疫荧光染色显示ABRA广泛表达于神经元的胞核、胞浆和突起，在脊髓前