nesfatin-1及其mrna在大鼠生长轴上的表达与作用研究

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1、：Ｓ８５２：１０３６４分类号单位代码密级：学号：Ｓ１０Ｑ９Ｑ６Ｑ３５７２签傲朵也太ｆ硕±学位论文Ｎｅｓｆａｔｉｎ－１ｍＲＮ及其乂在大鼠生长轴上的表达与作用硏究ｒｅｓｓ－ＥｘｐｉｏｎａｎｄＲｏｌｅｏｆＮｅｓｆａ村ｎｌａｎｄｉ《ｓＭ旣ＮＡ至〇ＧｒｏｗｔｈＡｊｄｓｏｆ技ｔ研究生：李冉指导教师：李福宝教授合作指导教１１和方富贵教授申请学位口类级别：农学硕古专业名称：临床兽医学石开究方向：兽医临床诊打技术所在学院；动物

2、科技学院＿＿答辩委员会主席：濟二〇—五年六月AnhuiAgriculturalUniversityMasterDissertationExpressionandRoleofNesfatin-1anditsmRNAinGrowthAxisofRatCandidate：LiRanSupervisor：LiFu-baoCo-supervisor：FangFu-guiMajor：ClinicalVeterinaryMedicineResearchField：VeterinaryClinicalDiagnosticandTreat

3、mentalTechnologyInstitute：CollegeofAnimalScienceandTechnologyJune2015本项研究受下列基金资助：高等学校博士学科点专项科研基金博导类资助课题（20123418110004）SupportedbySpecializedResearchFundfortheDoctoralProgramofHigherEducationfromMinistryofEducationScienceandTechnologyDevelopmentCenter,Beijing,P.R.China

4、(Grant20123418110004).独创性声明本人声明所呈的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取。得的研究成果据我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研巧成果，也不包含为获得安徽农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料一同工作。与我的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢ｎＶ．学位论文作者签名：珠典．．签字日期：年＾月作日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规

5、定，，有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子文件允许论文被查阅和借阅。本人授权安徽农业大学可将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，收录到《中国学位论文全文数据库》，可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）。学位论文作者签名：指导教师签名；寺命＾＞Ｐ签字曰期：＜５年＾月曰签字曰期：＞／巧月／曰少（＾摘要Nesfatin-1为一种源于核组蛋白2(NucleobindinⅡ,NUCB2)的厌食肽，广泛的分布

6、于中枢及外周器官。研究表明，Nesfatin-1对摄食、心血管功能、生殖功能、胃肠道功能及胰岛素分泌等方面具有一定的调节作用。鉴于Nesfatin-1摄食有一定程度的影响，而摄食与生长密切相关，本研究旨在研究Nesfatin-1及其mRNA在大鼠生长轴上的表达与作用，为Nesfatin-1在调控动物生长方面的研究提供科学的理论依据。方法：（1）成年雌性SD大鼠(220-250g)5只，处死后取下丘脑、垂体、胰腺、肝脏、肌肉、胃及十二指肠，4%多聚甲醛固定，常规石蜡切片，厚度为5µm，采用免疫组织化学PV-9000两步法染色，光学显微

7、镜下观察并拍照，使用江苏捷达JEDA801D软件分析平均光密度。（2）10d，25d，42d及80dSD大鼠各5只，颈静脉采血，处死后取下丘脑，分别采用实时荧光定量PCR方法及酶联免疫分析方法测定下丘脑NUCB2mRNA及血清Nesfatin-1浓度。（3）25d雌性SD大鼠15只随机分为试验组5只和对照组10只，对照组中有5只不做任何处理饲喂至阴门开启，记录时间（42.67±1.83d）。1%戊巴比妥钠0.5ml腹腔注射，麻醉后固定于大鼠脑立体定位仪，试验组侧脑室注射10µlNesfatin-1（含50pmol），对照组注射10µ

8、l的生理盐水，饲喂至试验组阴门开启时（31.83±1.27d），处死试验组所有大鼠及对照组5只大鼠，取下丘脑、垂体、肝脏、胰腺，荧光定量PCR法检测NUCB2mRNA及下丘脑生长激素释放激素（Growthhormone-releasi