《实验工作手册》doc版

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1、目录目录目录I第一章规章制度1一、实验室管理制度1二、实验室安全制度2三、计算机和互联网使用制度3四、科室值班制度4五、科研试剂和耗材购领管理制度5六、实验人员管理制度6七、医学实验科主任职责7八、实验室负责人职责8九、实验室工作人员职责9十、仪器设备使用管理制度10第二章主要实验室11一、细胞生物学实验室11（一）管理规定11（二）细胞培养准备技术11（三）常用仪器使用指南121．全自动高压灭菌锅122．Olympus倒置荧光显微镜133．超净工作台134．CO2细胞培养箱135．久保田常温低速离心机146．纯水机14（四）细胞培养用液

2、的制备14（五）细胞培养基本技术161．原代细胞培养方法162．传代163．细胞冻存164．细胞复苏175．细胞计数方法176．细胞生长曲线测定177．细胞活力检测188．细胞爬片制备189．细胞蛋白质含量测定法1810．流式细胞仪检测前的细胞准备19二、分子生物学实验室20（一）常用试剂配制20（二）常用仪器使用指南231．移液器操作规范232．移液器的维护与保养233．SIGMA1－15K离心机244．BYQ6044恒温金属浴255．志诚ZHWY-200B恒温培养振荡器256．752型紫外分光光度计267．BECKMANDU530分光

3、光度计278．PE2400PCR仪279．博日XP梯度PCR仪（运行单模块PCR程序）2810．BIO-RAD(UniversalHoodII)凝胶成像系统2911．GenePluserXcell电转移仪3012．Rotor-GeneQ实时定量PCR仪3113．超低温冰箱使用注意事项3314．艾科浦Apuapro超纯水机使用说明34（三）常用实验技术341．DNA琼脂糖凝胶电泳操作步骤34-131-目录2．质粒DNA制备353．PCR技术364．质粒DNA转化大肠杆菌（CaCl2转化法的实验步骤）365．DNA转染哺乳动物细胞376．外周

4、血淋巴细胞RNA的提取及逆转录377．外周血、细胞和组织块DNA提取技术398．外周血、细胞和组织块RNA提取技术409．DNA片段的酶切和连接41三、免疫学实验室42（一）常用仪器设备使用和维护421．BioLogicLP层析系统422．Biocell洗板机423．Biocell酶标仪434．OPTIZEN2120UV分光光度仪435．JY9L-2D超声波细胞粉碎机446．ColeParmerMasterFlexL/S超滤仪447．Qubit荧光分光光度计44（二）常用实验技术441．蛋白质相关技术简介442．ELISA技术51四、病理

5、学实验室53（一）常用试剂配制53（二）常用仪器设备使用和维护571．组织脱水机572．石蜡包埋机573．冷冻台574．摊片机和烤片器575．石蜡切片机586．普通显微镜587．荧光显微镜598．.电子天平599．HMIAS-2000高清晰度彩色医学图文分析系统59（三）常规病理技术介绍611．组织取材的一般原则612．细胞取材及制片方法613．常规石蜡包埋步骤614．苏木素－伊红染色（hematoxylin－eosinstation,HE染色）61（四）酶组织化学技术621．碱性磷酸酶（alkalinephosphatase,AKP）显

6、示法622．酸性磷酸酶（acidphosphatase,ACP）显示法623．三磷酸腺苷酶（adenosintriphosphatase,ATP酶）显示法634．琥珀酸脱氢酶（succinatedehydrogenase,SDH酶）显示法64（五）免疫组织化学技术641．链亲合素法又称S-P法642．葡萄糖多聚过氧化物酶标记法（Envision法）：663．CAS催化信号放大法674．免疫荧光组织化学染色方法67（六）核酸分子杂交技术671．DNA原位分子杂交682．同位素标记的RNA核酸探针原位分子杂交693．原位PCR（扩增DNA靶序

7、列的原位PCR）70（七）细胞凋亡检测技术71（八）电镜样品制备721．透射电镜样品制备操作步骤：722．免疫电镜样品制备技术73五、综合实验室75（一）主要职能75（二）常用仪器设备使用和维护751．BECKMAN-22R冷冻离心机75-131-目录2．BECKMAN-18常温离心机763．DUPONT-RC5C高速冷冻离心机774．Forma4585摇床775．博日GENEQPCR基因扩增仪786．Bio-Rad半干转印仪797．蛋白检测加速器操作规程808．蛋白检测加速器优化指南819．志诚ZHWY-200B恒温培养振荡器8110．

8、752型紫外分光光度计8211．艾科浦Apuapro超纯水机使用说明82（三）常用实验技术821．免疫印迹技术822．基因扩增86六、遗传实验室89（一）常用试剂配制89（二）常用仪器设备使用