激活素a对lx-2细胞增殖、分泌及激活素受体相互作用蛋白2表达的影响

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1、分类号学号M200975210学校代码10487密级硕士学位论文激活素A对LX-2细胞增殖、分泌及激活素受体相互作用蛋白2表达的影响学位申请人:方胜英学科专业:临床检验诊断学指导教师:曾令兰教授答辩日期:2012年5月ADissertationSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofmedicineEffectsofactivinAontheproliferation,secretionandtheexpressionofact

2、ivinreceptor-interactingprotein2inLX-2Candidate:FangShengyingMajor:MedicalLaboratorySupervisor:Prof.ZengLinglanHuazhongUniversityofScienceandTechnologyWuhan,Hubei430074,P.R.ChinaMay,2012独创性声明本人郑重声明,本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果的总结。尽我所知,除文中已经标明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集

3、体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。学位论文作者签名:日期:年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□,在_____年解密后适用本授权书。本论文属于不保密□。

4、(请在以上方框内打“√”)学位论文作者签名:指导教师签名:日期:年月日日期:年月日目录摘要…………………………………………………………………………1Abstract……………………………………………………………………………3前言…………………………………………………………………………5第一部分激活素A对LX-2细胞增殖的影响材料和方法……………………………………………………………………6结果……………………………………………………………………8讨论……………………………………………………………………11第二部分激活素A对L

5、X-2细胞分泌细胞外基质及激活素受体相互作用蛋白2表达的影响材料和方法……………………………………………………………………12结果……………………………………………………………………19讨论……………………………………………………………………23结论…………………………………………………………………………26参考文献…………………………………………………………………………27综述…………………………………………………………………………29附录…………………………………………………………………………47致谢………………………

6、…………………………………………………48华中科技大学硕士学位论文激活素A对LX-2细胞增殖、分泌及激活素受体相互作用蛋白2表达的影响华中科技大学同济医学院附属协和医院感染科实验室硕士研究生:方胜英导师:曾令兰教授摘要目的:通过观察激活素A(activinA,ACTA)对人肝星状细胞(hepaticstellatecell,HSC)系LX-2细胞增殖、分泌细胞外基质(extracetularmatrix,ECM)的影响及激活素受体相互作用蛋白2(activinreceptor-interactingprotein2,ARI

7、P2)在LX-2中的表达情况,探讨治疗激活素诱导的肝纤维化的基因靶点。方法:用CCK-8法检测ACTA对LX-2细胞增殖的影响,确定ACTA作用浓度;设置空白对照组与ACTA作用组,取培养上清,用化学免疫发光法检测Ⅲ型前胶原N端肽(amino-terminalpeptideoftypeⅢprocollagen,PⅢNP)、Ⅳ型胶原(typeⅣcollagen,Ⅳ-COL)、透明质酸(hyaluronicacid,HA)及层粘连蛋白(laminin,LH)的含量;收集细胞,实时荧光定量PCR检测LX-2细胞激活素ⅡA型受体(

8、activinreceptorⅡA,ActRⅡA)、激活素ⅡB型受体(activinreceptorⅡB,ActRⅡB)和ARIP2mRNA的表达;westernblot进一步观察ActRⅡA、ActRⅡB、ARIP2蛋白的表达。结果:1、ACTA可刺激LX-2增殖,1-20μg/L浓度范围内作用轻微(

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