血管内皮生长因子反义寡核苷酸联合血管生成素-1对大鼠糖尿病视网膜病变的影响

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1、南昌大学硕士学位论文血管内皮生长因子反义寡糖核苷酸联合血管生成素--1对大鼠糖尿病视网膜病变的影响姓名：常以力申请学位级别：硕士专业：眼科学指导教师：曾莉201206摘要目的：观察血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸(ASODN)联合血管生成素．1(Ang．1)对糖尿病视网膜病变大鼠视网膜渗漏及新生血管生成的影Ⅱ向。方法：选取健康雄性SD大鼠80只，其中随机抽出5只作为正常对照组(A组)，再将剩余75只大鼠分别按照60mg／Kg一次性左下腹腹腔注射浓度为1％的链脲佐菌素(STZ)溶液，24小时后经尾静脉采血测血糖，将血糖>16．7mmol／L的大鼠定为糖尿病大鼠模型：将糖尿病

2、造模成功的大鼠再饲养5个月行眼底血管荧光造影检查(FFA)，确定糖尿病视网膜病变(DR)大鼠模型且病变程度相仿的大鼠，随机抽取其中45只共分为五组：DR对照组(B组)5只，PBS缓冲液对照组(C组)10只，VEGFASODN干预组(D组)10只，Ang．1干预组(E组)10只，联合干预组(F组)10只。C组玻璃体腔注射PBS缓冲液59l：D组玻璃体腔注射浓度为1001．tmol／L的VEGFASODN溶液51．tl；E组玻璃体腔注射浓度为160¨g／ml的Ang．1溶液5I，tl；F组玻璃体腔注射100“mol／L的VEGFASODN溶液59l及160tag／ml的Ang一1溶液

3、5“l；三天后再次行上述操作。再隔三天后行眼底血管荧光造影检查(FF’A)，对比观察不同组别大鼠视网膜渗漏情况；同时处死大鼠摘出眼球行病理组织切片光学显微镜下观察视网膜新生血管芽细胞核数。结果：1．眼底血管荧光造影：玻璃体腔注药后A、B、C、D、E和F各组视网膜平均新生血管渗漏面积(mm2)分别为：0、4．53士0．71、4．46+0．62、3．14+0．22、3．34+0．26、1．53+0．24；正常对照组(A组)未见视网膜渗漏，与DR对照组(B组)、PBS缓冲液对照组(C组)、VEGFASODN干预组(D组)、Ang一1干预组(E组)、联合干预组(F组)比较差异有明显统计学

4、意义(P<0．01)；DR对照组(B组)与PBS缓冲液对照组(C组)之间平均荧光渗漏面积未见明显异常，差异无统计学意义(P>0．05)；VEGFASODN干预组(D组)、Ang．1干预组(E组)、联合干预组(F组)平均荧光渗漏面积低于DR对照组(B组)、PBS缓冲液对照组(C组)，差异均有统计学意义(P<0．05)；联合干预组(F组)平均荧光渗漏面积低于VEGFASODN干预组(D组)、Ang．1干预组(E摘要组)，差异均有统计学意义(P

5、1、81．08-4-2．57、37．37+3．41、41．07士2．09、14．41士1．23；正常对照组(A组)视网膜各层结构清晰，排列整齐，形态相似，视网膜偶见突破内界膜的血管芽细胞核，与DR对照组(B组)、PBS缓冲液对照组(C组)、VEGFASODN干预组(D组)、Ang．1干预组(E组)、联合干预组(F组)比较差异有明显统计学意义(P<0．01)；DR对照组(B组)或PBS缓冲液对照组(C组)视网膜均可见大量突破内界膜的血管芽细胞核，血管明显扩张，视网膜各层结构及细胞排列明显紊乱，视网膜组织水肿，两者间差异无统计学意义(P>O．05)；VEGFASODN干预组(D组)、

6、Ang．1干预组(E组)、联合干预组(F组)突破内界膜的血管芽细胞核数均低于DR对照组(B组)、PBS缓冲液对照组(C组)，差异均有统计学意义(P

7、observetheLeakageeffectofartificialdiabeticretinopathyratsretinalneovascularizationonthecombinationofvascularendothelialgrowthfactorAntisenseoligonucleotide(VEGFASODN)andAngiopoietin·1(Ang一1)．Method：EightyhealthymaleSprague-Dawley(SD)ratswere