血管紧张素ii和血管内皮生长因子在视网膜新生血管

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1、血管紧张素II和血管内皮生长因子在视网膜新生血管【摘要】目的：探讨血管紧张素II(angiotensinII,AngII)和血管内皮生长因子(vascularendothelialgroentofretinalneovascularization.METHODS:Itcontrolexperimentalstudy.FortysevendayoldC57BL/6Jmicelyincludingnormalcontrolgroupandhyperoxiamodelgroup.Hyperoxiamodelgroupodelofox

2、ygeninducedretinopathy.Fluorescentangiographytheretinaintothevitreousincrosssections.AngIIandVEGFproteinlevelsinretinaseasuredbyalcontrolgroup.Thenumberofendothelialcellsofneretinatovitreousodelgroup(43.23±2.57)asparedalcontrolgroup(1.37±0.93)(P=0.00).Theexpressiono

3、fAngIIproteininretinasodelgroup(0.365±0.004)paredalcontrolgroup(0.035±0.003)(P=0.00).TheexpressionofVEGFproteininretinasodelgroup(0.372±0.004)paredalcontrolgroup(0.049±0.007)(P=0.00).CONCLUSION:Thereisspecificrelationbetotingeffect.AngIIparticipateintheoccurrenceand

4、developmentofretinalneovascularizationviatheupregulationtheexpressionofVEGF.KEY;angiotensinII;vascularendothelialgrowthfactor0引言视网膜新生血管是糖尿病视网膜病变和早产儿视网膜病变等增生性视网膜病理改变的主要特征[1]。在这些增生性视网膜病变中，视网膜新生血管形成导致视网膜水肿、出血、脱离等严重影响视力的并发症[1]。尽管刺激视网膜新生血管生长的因素还未完全明确，但有证据显示参与此过程的不仅有血管源性的

5、细胞因子如血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)，还包括血管活性激素如血管紧张素II(angiotensinII，AngII)[2]。在增生性视网膜病变的发生、发展过程中，肾素血管紧张素系统(reninangiotensinsystem，RAS)中主要效应介质AngII可能与特异性生长因子特别是VEGF相互作用来影响视网膜的发育和功能，最终共同导致视网膜新生血管形成。本研究的目的在于探讨视网膜新生血管发生发展过程中，AngII和VEGF影响视网膜新生血管形成的机制。1材

6、料和方法1.1材料实验动物：鼠龄7d的健康C57BL/6J清洁级新生小鼠(中国医科大学动物部)40只，体质量4.0～5.0g，性别不限，与哺乳母鼠共同饲养。药品试剂：卡托普利(美国BristolMyersSquibb公司)、缬沙坦(瑞士Novartis公司)、BCA蛋白定量试剂盒(美国Pierce公司)、ECL发光试剂盒(美国Pierce公司)、异硫氰酸葡聚糖荧光素(美国Sigma公司)、兔抗小鼠AngII多克隆抗体(美国Sigma公司)、兔抗小鼠VEGF多克隆抗体(美国Sigma公司)、羊抗小鼠IgGHRP(美国Sigma公

7、司)。1.2方法动物分组和模型建立：将40只7d龄C57BL/6J清洁级新生小鼠随机分为两组：正常对照组和高氧模型组，每组20只。参照Smith等[3]的方法建立氧诱导视网膜病变模型，高氧模型组小鼠及哺乳母鼠置于密闭氧箱中，控制氧浓度为(75±2)%，5d(鼠龄12d)后回到正常空气环境中，正常对照组一直置于正常空气环境中。所有动物保持温度(21±1)°C，光照黑暗循环/12h。荧光素血管灌注视网膜铺片：两组鼠龄17d的小鼠各取2只，将异硫氰酸葡聚糖荧光素(分子量：2×106)溶于1mL的40g/L多聚甲醛中，经左心室灌注(3

8、0mL/kg)，摘取眼球，于40g/L多聚甲醛中固定1h，游离视网膜，以视盘为中心呈放射状对称切开，用抗荧光衰退封片剂将视网膜封片，采用荧光显微镜(日本Olympus公司)观察视网膜血管形态的变化。突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核计数：两组鼠龄17d的小鼠各取3只，摘除眼球后