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时间:2018-11-23
《血管内皮生长因子反义寡核苷酸联合低分子肝素治疗小鼠膀胱癌》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、血管内皮生长因子反义寡核苷酸联合低分子肝素治疗小鼠膀胱癌作者:范海涛,王秀岩,柴红梅,刘禄成【摘要】目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸和低分子肝素法安明单用或联合对小鼠膀胱癌、转移的抑制作用。方法制备小鼠膀胱癌模型40只,随机分为对照组、VEGF反义寡核苷酸(ASODN)组、VEGF错义寡核苷酸(MSODN组)、低分子肝素(LMSODN、法安明及VEGFASODN+法安明皮下注射,隔日1次,共15次。检测皮下移植瘤变化和盆腔淋巴结转移率;应用免疫组织化学的方法检测肿瘤组织微血管密度(MVD);应用SODN、ASODN、LMSODN组表达较
2、高水平的VEGF;ASODN组和联合治疗组MVD分别为(11.34±3.03)和(10.01±1.25),与对照组(21.23±4.01)和MSODN组(18.21±3.36)相比,差异有统计学意义(P<0.01);LMVD为(13.04±6.53),较对照组和MSODN组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论VEGFASODN和法安明具有下调VEGF表达,抗血管生成作用;两者联合应用有协同抗肿瘤作用。【关键词】膀胱癌;血管内皮生长因子;低分子量肝素 Abstract:ObjectiveToinvestigatetheinhibit
3、oryeffectofvascularendothelialgro(fragmin)ontumorgroetastasisofmicebladdercancer.MethodsFortymiceizedlydividedintofivegroups:controlgroup,VEGFantisenseoligonucleotides(ASODN)group,VEGFmismatchsenseoligonucleotides(MSODN)group,loolecularchloride,VEGFASODN,VEGFMSODN,fragmin,andVE
4、GFASODNplusfragminesaltogether).Thevolumeandorseasured,andtherateofpelviclymphonodemetastasisicrovesseldensity(MVD)intumormasseasuredbyimmunohistochemistrystaining.VEGFproteinlevelintumortissueent,thetumorgrophonodemetastasisinmaydoincanenhanceantiumoreffectofVEGFASODN. Keyol
5、ecularolecularatchsenseoligonucleotide,MSODN)[6],现将VEGFASODN和低分子肝素法安明单用或联用治疗荷膀胱癌小鼠,探讨两者对肿瘤生长和转移的抑制作用及其相关机制。 1材料与方法 1.1主要试剂法安明(Fragmin,dalteparinsodiuminjection)由辉瑞制药有限公司惠赠;Ⅷ因子相关抗原(FactorⅧrelatedantigen)一抗,PV9000试剂盒,VEGF鼠多克隆抗体IgG,美国Zymed公司产品。 1.2荷膀胱癌小鼠模型的建立人膀胱移行细胞癌系T24购自中科院上海
6、分院细胞所;雌性C57BL近交系小鼠,6周龄,体重(20±2)g,二级清洁动物,由吉林大学实验动物中心提供。参见 2.2肿瘤组织的病理学检查HE染色光镜下观察,各组肿瘤细胞均大小不等,胞浆丰富,核大、深染、大小不一,细胞形态间无明显区别。ASODN组、联合治疗组及LMSODN组。 表1各组间瘤重和抑瘤率的比较(略) 2.3对肿瘤转移的影响:HE染色光镜下观察,可见盆腔淋巴结转移,余脏器未见转移,见表2。各脏器均未见出血。各组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。 表2肿瘤盆腔淋巴结转移的比较(略) 2.4各组间肿瘤组织MVD比较
7、ASODN组和联合治疗组MVD分别为(11.34±3.03)和(10.01±1.25),与对照组(21.23±4.01)和MSODN组(18.21±3.36)相比,差异有统计学意义(P<0.01);LMVD为(13.04±6.53),较对照组和MSODN组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。 2.5各组间肿瘤组织VEGF蛋白的表达SODN组表达较高水平的VEGF,ASODN组和联合治疗组可明显下调VEGF的表达,见图1。 M:标准参照物;L1:ASODN组;L2:LMSODN组;L4:ASODN+LMSODN组无抑瘤作用;LMVD检测
8、,发现各组细胞形态无明显改变,ASODN、联合治疗组及LM,MatsumotoT
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