缝隙连接蛋白43在七氟醚对大鼠离体心肌缺血再灌注中的作用

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1、重庆医科大学硕士学位论文缝隙连接蛋白43在七氟醚对大鼠离体心肌缺血再灌注中的作用姓名：庞勇申请学位级别：硕士专业：麻醉学指导教师：刘新伟201205重庆医科大学硕士研究生学位论文缝隙连接蛋白43在七氟醚对大鼠离体心肌缺血再灌注中的作用摘要目的：观察缝隙连接蛋白43(Cx43)分别在七氟醚预处理、七氟醚后处理保护大鼠离体心肌缺血再灌注中的作用。方法：1．缝隙连接蛋白43在七氟醚预处理保护大鼠离体心肌缺血再灌注中的作用。健康成年雄性SD大鼠40只，体重200～2509，采用随机数字表法将其随机分为5组(n=8)：对照组(C组)、缺

2、血再灌注组(IR组)、七氟醚预处理组(s组)、七氟醚混合5一羟基葵酸钠(5-HD)组(SH组)及5-HD组(H组)。大鼠离体心脏灌注使用经典的Langendorff灌注装置。除C组外，各组阻断左冠状动脉(LAD)30min后再灌注120min建立IR模型。S组、SH组和H组分别于阻断LAD前30rain用3％七氟醚预饱和的K—H液、3％七氟醚预饱和的K．H液混合5-HD100ummol／L及混合5-HD100ummol／L的K．H液灌注15min后普通K．H液冲洗15min。分别于给药前(TO)、给药后15min(T1)、阻断

3、LAD前即刻(T2)、开放LAD前即刻(T3)、再灌注120min(T4)时记录HR、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张压(LVDP)、左心室最大上升及下降速率(4-dp／dtmax)。再灌注结束后，取左心室TTC染色重庆医科大学硕士研究生学位论文测定心肌梗死体积，采用免疫组化染色观测Cx43蛋白表达情况，采用WesternBlot法检测Cx43蛋白及磷酸化Cx43蛋白含量。2．缝隙连接蛋白43在七氟醚后处理保护大鼠离体心肌缺血再灌注中的作用。健康成年雄性SD大鼠40只，体重200-250g，采用随机数字表法将其随机分为4组

4、(n=10)：缺血再灌注组(IR组)、七氟醚后处理组(S组)、七氟醚混合5．羟基葵酸钠(5一皿)组(SH组)及5-HD组(H组)。采用Langendorff装置进行大鼠离体心脏灌注。各组均在阻断左冠状动脉(LAD)前维持灌注10min，然后阻断LAD血流30rain后开放，再灌注120rain，其中S、SH及H组分别于LAD开放后使用3％七氟醚预饱和的K．H液、3％预饱和的七氟醚预充饱和的K．H加5．皿(100ummol／L)及加入5一皿(100l-tmmol／L)的K．H液灌注15min，然后使用普通K．H液继续灌注105m

5、in。分别于阻断LAD前即刻(TO)，开放LAD即刻(T1)，开放LAD后15min(T2)，开放LAD后135rain(T3)时记录HR、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张压(LVDP)、左心室最大上升及下降速率(±dp／dtmax)。再灌注结束后，取左心室TTC染色测定心肌梗死面积，采用免疫组化染色观测Cx43蛋白表达情况，采用WesternBlot法检测Cx43蛋白及磷酸化Cx43(p．Cx43)蛋白含量。结果：1．与C组比较，IR组、SH组及H组的HR、LVSP、4-dp／dtmax降低，LVDP升高，Cx43蛋白及

6、磷酸化Cx43蛋白含量降低(P<0．05)；气重庆医科大学硕士研究生学位论文S组上述指标无显著性差异(P>O．05)。与IR组比较，S组的HR、LVSP，±dp／dtmax升高，LVDP降低，心肌梗死体积缩小，Cx43蛋白及磷酸化Cx43蛋白含量增加(P0．05)。2．与IR组比较，S组的HR、LVSP、±dp／dtmax较高，LVDP降低，心肌梗死面积小，Cx43蛋白及p-Cx43蛋白含量增加，有统计学意义(P<0．05)。IR组与SH组及H组之间相比HR、LVS

7、P，±dp／dtmax，LVDP，心肌梗死面积、Cx43蛋白和p-Cx43蛋白差异无显著性(P>O．05)。结论：七氟醚预处理和七氟醚后处理减轻离体大鼠心肌IR损伤的作用，都可能与其首先开放线粒体敏感钾通道，然后促进Cx43蛋白表达及其磷酸化有关。关键词：七氟醚，缺血再灌注，缝隙连接蛋白434重庆医科大学硕士研究生学位论文THERoLEOFCoNNECTIoN43INTHEPROTECTIVEEFFECTOFSEVOFLURANEONMYOCARDIUMAGAINSTISCHEMIA．REPERFUSIONINJURYINOb

8、jectiveISOLATEDRATHEARTSABSTRACTToinvestigatetheroleofconnection43intheprotectiveeffectofsevofluranepreconditioningandpost—conditioningonm