镁对大鼠离体缺血再灌注心肌的作用

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1、镁对大鼠离体缺血再灌注心肌的作用作者：张君平，杜友爱，郭益民，刘重斌，余立群【摘要】目的:观察在缺血再灌注5min后应用镁剂是否能对离体缺血再灌注心肌起到保护作用。方法:建立Langendorff离体心脏缺血再灌注模型，结扎冠状动脉左前降支，缺血20min，复灌60min，高镁组在复灌5min时应用浓度为2.4mmol/L、4.8mmol/L、8.4mmol/L的高镁K-H液灌注10min。观察心脏血流动力学指标，实验结束时测心肌匀浆MDA含量，免疫组化检测SOD的含量。结果:①复灌15min时三个高镁组LVSP、LVDP×HR、LV±dp/dtmax明显低于缺血再灌组。②复灌60min时三个

2、高镁组各指标与缺血再灌组相比差异无显著性。③三个高镁组MDA含量明显低于缺血再灌组，SOD阳性表达明显高于缺血再灌组。结论:缺血再灌注5min应用高镁K-H液对缺血再灌注心肌的即时作用表现为抑制心脏的血流动力学，复灌结束测得的MDA含量说明镁对心肌有保护作用，体现为抗脂质氧化作用。【关键词】高镁；心肌；缺血再灌注Abstract:Objective:Toinvestigatetheroleofhighmagnesiumonratisolatedheartsafter5minofischemia/reperfusion.Methods:Cardiachemodynamicsindicatorse

3、thodinrat’sisolatedheart.MDAinedintheexperiment.Allisolatedheartsinofischemiafolloinofreperfusion.Results:①Thegroupsofhighmagnesium,perfusedmol/L,4.8mmol/L,8.4mmol/Lmagnesiumafter5minofreperfusionfor10min,leftventricularsystolicpressure,multiplicationofleftventriculardevelopedpressureandheartrate,an

4、dleftventricular±dp/dtmaxintlydecreasedparedagnesiumgroupsagnesiumgroupsagnesiumcaninhibitmyocardium,ischemia/reperfusioninjury.Thecardioprotectionmaybethroughanti-lipid-oxidationtodecreaseMDAconcentration.Keyagnesium;myocardium;ischemia/reperfusion心肌缺血再灌注损伤临床主要表现为再灌注性心律失常、心功能下降和心肌坏死面积扩大等。近年来，镁在心血管疾

5、病中的作用日益受到重视，在体和离体缺血再灌注研究[1-4]说明，在缺血期或再灌注即时应用高镁对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。本实验观察在缺血再灌注5min后应用镁剂对缺血再灌心肌的作用。1材料和方法1.1实验动物和试剂Sprague-DamHg。平衡灌注20min时测定血流动力学指标，作为基础值。1.3实验分组SD大鼠随机分成5组，每组8只。假手术组（S组）冠状动脉左前降支穿线不结扎，维持灌注100min；缺血再灌注组（C组）平衡20min，结扎冠状动脉左前降支，缺血20min后松开，复灌60min；高镁组分别在再灌注后5min用镁浓度为2.4mmol/L（H1组）、4.8mmol/L（H2

6、组）、8.4mmol/L（H3组）的K-H液灌注，10min后换回正常K-H液，其余操作同缺血再灌注组。1.3指标测定1.3.1心功能测定指标：通过MedLab生物信号采集处理系统获得的数据观察缺血再灌注过程中大鼠心脏在平衡末、复灌15min、复灌60min时的心率（HR）、左心室收缩末期压力（LVSP）、左心室舒张末期压力（LVEDP）、左心室压力变化率（LV±dp/dtmax），计算左心室做功（LVDP×HR）；在上述时点收集冠脉流出液，计时1min，测冠脉流出量（CF）。1.3.2心肌MDA的测定（TBA法）：实验结束后，取结扎点以下的左心室游离心肌组织，在4℃的生理盐水冰浴中制成10%

7、心肌匀浆，离心(3000r/min，15min)，取上清液，按照试剂盒说明测定丙二醛（malondialdehyde，MDA）的含量。1.3.3心肌SOD免疫组化检测（SABC法）：实验结束后，取结扎点以下的左心室游离心肌组织，4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，切片。常规脱蜡，严格按照试剂盒说明书步骤，检测心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）。棕黄色显色为SOD阳性表达。用ImageProPlus（IPP