线粒体敏感性钾通道在七氟醚预处理对离体大鼠缺血再灌注心肌的延迟性保护作用

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1、硕士学位论文论文题目线粒体敏感性钾通道在七氟醚预处理对离体大鼠缺血再灌注心肌的延迟性保护作用胡素梅研究生姓名指导教师姓名王琛专业名称麻醉学研究方向生命重要脏器保护论文提交日期2013.06I线粒体ATP敏感性钾通道在七氟醚预处理对大鼠离体缺血再灌注心脏延迟性保护中的作用中文摘要目的：探讨线粒体ATP敏感性钾通道（mito-KATP通道）介导的ε型蛋白激酶C（PKC-ε）在七氟醚预处理对大鼠离体缺血再灌注心脏延迟性保护中的作用机制。方法：健康成年雄性SD大鼠72只，体重270～350g，随机分为6组（n＝12）：对照组（CON组）、缺血

2、再灌注组（I/R组）各吸入33%氧气（O2）1h；七氟醚对照组（SEVO组）、七氟醚预处理组（SWOP组）各吸入2.5％七氟醚1h；5-羟葵酸＋七氟醚预处理组（5-HD+SWOP组）于七氟醚预处理之前30min腹腔注射mito-KATP抑制剂5-羟葵酸（5-HD）10mg/kg；5-HD组腹腔注射5-HD10mg/kg。24h后建立大鼠Langendorff离体心脏灌注模型，除CON组和SEVO组，其余组停止灌注30min，再灌注2h。于再灌注2h（T4）时氯化三苯基四氮唑染色法（TTC法）测定心肌梗死范围，计算心肌梗死体积百分比。于

3、缺血前即刻（T0）和T4时酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清肌钙蛋白（IcTnI）浓度，Westernblot法检测磷酸化的ε型蛋白激酶C（p-PKC-ε）、Caspase-8蛋白表达水平。结果：与CON组比较，I/R组、SWOP组、5-HD+SWOP组、5-HD组T4时心肌梗死体积百分比升高，漏出液cTnI浓度升高；SEVO组和SWOP组T0时，I/R组、SWOP组、5-HD+SWOP组、5-HD组T4时心肌p-PKC-ε蛋白表达上调（P<0.05）。与I/R组比较，SWOP组和5-HD+SWOP组T4时心肌梗死体积百分比降低，漏

4、出液cTnI浓度降低；SEVO组和SWOP组T0时心肌p-PKC-ε蛋白表达上调，SWOP组T4时心肌Caspase-8蛋白表达下调（P<0.05）。与SWOP组比较，5-HD+SWOP组T4时心肌梗死体积百分比升高，漏出液cTnI浓度升高；T0时p-PKC-ε蛋白表达下调，T4时心肌Caspase-8蛋白表达上调（P<0.05）。II结论：Mito-KATP通道参与了七氟醚预处理减轻大鼠离体缺血再灌注心脏损伤的过程，可能与上调缺血前p-PKC-ε蛋白表达水平，抑制再灌注时细胞凋亡有关。关键词：麻醉药，吸入；心肌再灌注损伤；缺血预处理

5、；KATP通道；蛋白激酶Cε作者：胡素梅指导教师：王琛谢红IIIRoleofmitochondrialATP-sensitivepotassiumchannelinsevofluranepreconditioning-induceddelayedcardioproductionagainstischemia-reperfusioninjuryinisolatedratheartsAbstractObjective:ToresearchtheroleofmitochondrialATP-sensitivepotassium(mito-K

6、ATP)channelinsevofluranepreconditioning-reduceddelayedcardioproductionagainstischemia-reperfusion(I/R)injuryinisolatedrathearts.Methods:Seventy-twoadultmaleSprague-Dawleyratswererandomlydividedintosixgroups(n=12each):controlgroup(CONgroup).I/Rgroup,sevofluranecontrolgro

7、up(SEVOgroup),sevofluranepreconditioninggroup(SWOPgroup),5-hydroxydecanoate(5-HD)+sevofluranepreconditioninggroup(5-HD+SWOPgroup)and5-HDcontrolgroup(5-HDgroup).Theratswereexposedto33%pureoxygen1hinCONgroupandI/Rgroup.Theratswereexposedto2.5%sevoflurane1hinSEVOgroupandSW

8、OPgroup.5-HD(amito-KATPchannelinhibitor)10mg/kgwasinjectedintraperitoneally30minbeforesevofluranepreconditioni