紫杉醇提取物通过抑制jnk3信号通路对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的研究

紫杉醇提取物通过抑制jnk3信号通路对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的研究

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1、徐州医学院硕士学位论文紫杉醇提取物通过抑制JNK3信号通路对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的研究姓名:倪小宇申请学位级别:硕士专业:神经病学指导教师:沈霞2012-03徐州医学院硕士学位论文紫杉醇提取物通过抑制JNK3信号通路对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的研究中文摘要目的研究紫杉醇提取物对大鼠脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)后海马神经元损伤的保护作用的分子机制。方法将雄性SD大鼠随机分组为:假手术对照组(sham)、缺血对照组(I/R)、溶剂处理组(DMSO)、紫杉醇组(缺血前30rain脑室注射紫杉,

2、Pre—ischemia499/kg、8p眺g、12p,g/kg20I.tg/kg)。采用SD大鼠四动脉结扎脑缺血模型(4-VO),缺血对照组大鼠以20%水合氯醛(300~350mg/kg)腹腔注射麻醉后,分离双侧颈总动脉并电凝椎动脉。于手术第二天给予15rain缺血并复灌不同时间(6h,3d,5d);假手术对照组处理和缺血对照组相同,但不结扎双侧颈总动脉。紫杉醇组缺血前(Pre—ischemia499/kg、899/kg、12gg/kg、201.tg/kg)30min脑室注射紫杉醇样品,用于焦油紫染色实验;于缺血前(Pre—ische

3、mia8gg/kg)30min脑室注射紫杉醇,用于MLK3/JNK3/Fas—L蛋白表达和激活测定,以相同体积的DMSO(1%)脑室注射作为溶剂对照。应用免疫沉淀及免疫印迹方法分析MLK3/JNK3/Fas.L的蛋白表达量和激活情况;焦油紫染色,观察紫杉醇对大鼠海马神经元的保护作用.结果焦油紫染色观察,缺血对照组及溶剂处理组海马CAl区出现明显神经元死己,而紫杉醇组海马CAl区神经元无明显死亡迹象(氏0.05)。缺血15min/再灌6h,紫杉醇组P.MLK3出现明显抑制现象(P<0.05),而溶剂处理组无明显变化,MLK3总蛋白的表达量

4、未发现明显变化。缺血15min/再灌3d,紫杉醇组P—JNK3出现明显抑制现象(P

5、nase);MLK3(mixedlineagekinase);Fas—L徐州医学院硕士学位论文EffectandmechanismofPaclitaxelonneuronalinjuryinducedbycerebralischemia/reperfusionthoughJNK3signalingpathwayAbstractObjectiveTostudytheeffectsandmolecularmechanismsofpaclitaxel(P)onthebraininjuryofhippocampalneuronsinducedb

6、yischemia/reperfusion(I/R).MethodsThemaleSDratswererandomlydividedinto:sham—surgerygroup(sham),ischemiacontrolgroup(I/R),solventtreatmentgroup(DMSO),paclitaxelgroup(30rninbeforeischemiaventricularinjectionofyew,Pre-isehemia4g/kg,8g/kg,l2Ug/kg209/kg).Usingfour—vesselocclu

7、sion(4-VO)modelofSprague—Dawleyrats,ischemiacontrolgroupratst020%chloralhydrate(300~350mg/kg)afterintraperitonealinjectionofanesthesia,isolatedbilateralcommoncarotidarteryandelectrocoagulationofvertebralartery.Inthenextday,given15minischemiaandreperfusionatdifferenttime(

8、6h,3D,5d);sham—surgewgroupandcontrolgroupwiththesametreatmentofischemia,buttheligationofbilateralcommon

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