双固一通针法对衰老模型大鼠脾脏淋巴细胞凋亡的影响

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1、湖北中医药大学硕士学位论文“双固一通”针法对衰老模型大鼠脾脏淋巴细胞凋亡的影响姓名：毛慧芳申请学位级别：硕士专业：针灸推拿学指导教师：王华20120525中文摘要目的：随着社会的进步，医药保健水平的提高，如何延缓衰老已成为21世纪人们关注的热点。衰老问题已成为人类面临的前所未有的重要研究课题，寻找能延缓衰老和延长寿命的药物和方法，具有重要的经济效益和社会效益，而针灸在延缓衰老方面颇具特色和优势。本研究旨在探讨“双固一通”针法对衰老模型大鼠脾脏淋巴细胞凋亡率及其相关凋亡基因表达的影响，为其在防治衰老领域中的临床应用提供一定的实验依据。方法：5月龄

2、SD健康大鼠雌性40只，清洁级，体重(18o±20)g，根据简单随机排序法分为每组各1o只，即正常对照组、衰老模型组、“双固一通"电针组、电针对照组，采用D一半乳糖颈背部皮肤注射法造成大鼠亚急性衰老模型。“双固一通"电针组取“关元"、“后三里"、“百会”；电针对照组取“中极"、“阴陵泉”、“印堂"作为临近对照取穴。两组电针组均选用HANSLH202H型电针仪，连续波，频率2Hz，强度为lmA，通电15min。采用Morris水迷宫实验检测大鼠逃避潜伏期；化学发光免疫法检测大鼠血清SOD含量；AnnexinV双染流式细胞术检测大鼠脾脏淋巴细胞凋亡

3、率；实时荧光定量RT-PCR技术检测大鼠脾脏淋巴细胞中促凋亡基因Fas、BaxmRNh以及促凋亡基因BeI-2mRNA的阳性表达。结果：1．正常对照组大鼠逃避潜伏期找到平台时间为26s，衰老模型组大鼠逃避潜伏期找到平台时间为46s，与正常对照组相比显著延长(P<0．01)；“双固一通”电针组与电针对照组大鼠逃避潜伏期找到平台时间分别为30s和35s，两组之间比较，有显著性差异(P<0．05)；与模型组相比，有极显著性差异(P

4、(19．83±3．95)NU／ml，与正常对照组相比，大鼠SOD含量明显降低；“双固一通"电针组与电针对照组大鼠SOD含量各分别为(33．93±2．81)NU／ml、(45．316±4．42I)NU／ml，两组之间比较，有显著性差异(P

5、指标均显著增高，有显著性差异(均P<0．05)；“双固一通’’电针组和电针对照组比较，“双固一通"电针组干预调节作用优于电针对照组，有显著性差异(P<0．05)。4．正常对照组大鼠脾脏抗凋亡基因BcI-2mRNA(0．48i±0．I2)％、凋亡相关基因Bcl-2／Bax比值(0．966±0．018)；衰老模型组大鼠脾脏抗凋亡基因BcI-2mRNA(0．247±0．031)％、凋亡相关基因Bcl-2／Bax比值(0．323±0．041)，与正常对照组相比，抗凋亡基因Bci-2mRNA表达明显下调且凋亡相关基因Bc1-2／Bax比率显著降低；有极显

6、著性差异(PO．05)结论：1．电针

7、不仅能改善衰老模型大鼠下降的空间学>--j记忆能力，还能提高其血清中SOD含量，增强机体抗氧化反应，从而延缓衰老的发生。2．电针通过对淋巴细胞的过度凋亡进行干预，降低衰老模型大鼠脾脏淋巴细胞凋亡率，起到调节机体免疫功能的作用。3．“双固一通"针法通过上调抗凋亡基因Bcl-2mRNA的阳性表达，提高凋亡相关基因Bcl一2／Bax的比值，但对促凋亡基因FasmRNA的阳性表达作用不明显，通过增强脾脏细胞抗凋亡能力和脾脏细胞存活率，调节免疫功能，来延缓衰老的发生。协调与整合相关凋亡基因的表达，重塑基因平衡，这可能是该针法对衰老模型大鼠淋巴细胞相关凋亡

8、基因的表达调控模式。4．“双固一通”针法“关元"、“后三里"、“百会"对脾脏淋巴细胞凋亡的调节作用要明显优于电针对照组“中极’’、“阴陵泉’’、“印堂