双固一通电针对衰老模型大鼠学习记忆影响及其机制的研究

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1、湖北中医药大学学位论文原创性声明本人声明：所呈交的学位论文是在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得湖北中医药大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位沦文作者签名：豫．『；lA球弓"2,ol肄}月；j日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解湖北中医药大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可

2、以采用复印、缩印或其他手段保留学位论文；学校可以根据国家或湖北省有关部门的规定送交学位论文。同意《r扣国优秀博硕士论文全文数据库出版章程》的内容。同意授权中国科学技术信息研究所将本人学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。(保密论文在解密后遵守此规定)论文作者签名：儆、新牡易导师签名：≯11年岁月；1日／目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯IABSTRACT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯Ⅲ缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯Ⅵ前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯““1刚百⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯““实验一“双固一通”针法对衰老模型大鼠学习记忆的影响⋯⋯⋯31．材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32．结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5实验二“双固一通”针法对衰老模型大鼠海马CaM-CaMKII-CREB信号通路的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71．材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯72．结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9讨论⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·11结{吾⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯·211．附图⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯···⋯⋯⋯⋯⋯⋯212．综述⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·22致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29中文摘要目的随着老年化社会的到来，面对其所带来的各种问题，研究如何延缓衰老已成为刻不容缓的事实，尤其是针对老年化所致的学习记忆能力的减退，严重影响着老年人的生活质量。针灸治疗延缓衰老已被证明疗效显著，本课题旨在研究“双固一通’’针法对衰老模型大鼠学习记忆的影响及其可能的机制，为针灸临床提供实验依据

5、，并为今后更深入的实验研究打下一定基础。方法选用三月龄SD雄性大鼠30只，按照随机数表法每组10只分为正常对照组(Normalcontrolgroup，简写为NC)、衰老模型组(Modelgroup，简写为Modle)、“双固一通"电针组(Electroacupuncturetreatmentgroup，简写为EA)，Model、EA组按每日125mg／kgD一半乳糖连续40天颈背部皮下注射，制造衰老模型，NC组等量注射生理盐水。造模完成，EA组参照李忠仁主编《实验针灸学》取穴“关元”、“后三里’’和“百会’’，用华佗牌0．35mm×25mm不锈钢毫针针刺，“关元”直刺5～7mm；双侧“后三

6、里”直刺5～10mm，“百会”向后方平刺5mm，接韩式LH202H电针仪，双侧“后三里”隔日交替与“关元”接一对电极，连续被，2Hz，1mA，15min，每周一至周六治疗，周日休息，共4周。治疗结束后，采用Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力，共5天，结束第二天处死大鼠，取新鲜海马组织，免疫组织化学方法检测海马钙调蛋白(Calmodulin，CaM)表达水平，蛋白免疫印迹法检测(Westernblot)Ca2+／钙调蛋白依赖性蛋白激酶II(Calcium／calmodulin—dependentproteinKinaseII，CaMKII)、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CyclicAM

7、PResponseElement-Binding，CREB)的表达。结果与NC组相比，Modle组大鼠学习记忆能力显著下降，海马CaM、CaMKII、CREB蛋白含量均降低，差异具有统计学意义(P