中分子量羟乙基淀粉对大鼠脊髓损伤后血脊髓屏障及疼痛行为学变化的影响

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1、第三军医大学硕士学位论文中分子量羟乙基淀粉对大鼠脊髓损伤后血脊髓屏障及疼痛行为学变化的影响姓名：胡新宇申请学位级别：硕士专业：麻醉学指导教师：陶军；杨天德201205第三军医大学硕士学位论文中分子量羟乙基淀粉对大鼠脊髓损伤后血脊髓屏障及疼痛行为学变化的影响摘要目的。脊髓损伤(Spinalcordinjury，SCI))舌／t1．脊髓屏障遭到破坏，其与脊髓损伤后继发性疼痛(Spinalinjury—inducedpain，SIP)有无相关性目前知之不多。近年来的研究表明，脊髓内神经胶质细胞和炎症因子在SIP的发生发展中发挥了重要作用。本研究通过建立脊髓损伤后疼痛

2、模型，观察大鼠疼痛行为学变化，检测损伤段大鼠脊髓组织内伊文氏蓝含量，观察血脊髓屏障通透性变化和相关炎症因子(几．1p、IL一6、TNF—cc)，以及小胶质细胞／巨噬细胞的形态学和蛋白表达变化，从而观察中分子量羟乙基淀粉(HESl30／0．4)、低分子量羟乙基淀粉(HES40)及生理盐水对脊髓损伤后大鼠血脊髓屏障及疼痛行为学变化的影响。并初步探讨其可能的作用机制，为临床上完善治疗或预防脊髓损伤后继发性疼痛探求一种新思路。方法：1、成年SD大鼠，雄性，体重250+_109，取72只采用随机数字法分为生理盐水组、HES40组、HESl30／0．4组、假手术组，每组1

3、8只大鼠。其中假手术组只做相应的椎板去除术，其余三组大鼠利用NYU大鼠脊髓撞击仪I型制备脊髓(T10)水平撞击伤模型，术后相应各组即刻经尾静脉分别给予生理盐水、HES40、HESl30／0．4，以后均每日给药两次。手术组大鼠术后行膀胱按摩人工排尿，每日2．3次，直至大鼠恢复自主排尿反射。2、各组大鼠分别在术前ld、术后10d、14d、20d、30d、60d测后足机械痛敏压力阈值(pawwithdrawpressurethreshold，PWPT)和热痛敏潜伏期(pawwithdrawlatency，PWL)变化，同时观察对比各组大鼠疼痛行为学的表现。3、各组大

4、鼠术后3d，检测损伤段脊髓组织内伊文氏蓝相对含量进而观察血脊髓屏障变化情况。4、术后10d，免疫荧光组织化学法和Westernblot观察小胶质细胞／巨噬细胞溶酶体膜蛋白和内钙结合蛋白标记物EDl和Ibal活化及蛋白表达情况。5、ELISA法测定大鼠损伤段脊髓组织内IL一1D、IL一6及TNF．13t的表达变化。第三军医大学硕士学位论文6、采用SPSSl7．0统计学软件进行数据分析，以P锄．05为差异有统计学意义。结果：1、术后3d，HESl30／0．4组、HES40组、生理盐水组与假手术组相比，脊髓组织内伊文氏蓝相对含量为：生理盐水组：(2．58+0．29)

5、、HES40组：(2．384-0．47)、HESl30／0．4组：(1．38+0．34)。HESl30／0．4组伊文氏蓝相对含量分别较生理盐水组和HES40组显著降低CP

6、ESl30／0．4组活化的数量明显低于生理盐水组和HES40组。4、术后10d，各组大鼠Westernblot检测Ibal和EDl蛋白表达情况，QuantityOne软件进行灰度值分析，HESl30／0．4组、HES40组、生理盐水组大鼠较假手术组均明显升高(P

7、ESl30／0．4组：(0．384-0．054)、假手术组：(0．064-0．015)。HESl30／0．4组Ibal和EDl相对灰度值较生理盐水组和HES40组均明显下降(P<0．05)。5、术后10d，ELISA检测HESl30／0。4组、HES40组、生理盐水组大鼠损伤段脊髓组织内IL．1D、IL．6、TNF．0【与假手术组的相对表达量分别为：IL．1D相对表达量为：生理盐水组：(1．464-0．10)、HES40组：(1．42士0．14)、HESl30／0．4组：(1．184-0．11)；IL．6相对表达量为：生理盐水组：(1．324-0．12)、HE

8、S40组：(1．33士0．08)、HE