野菊花多糖的提取分离、免疫活性研究及分子量测定

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1、江苏大学硕士学位论文野菊花多糖的提取分离、免疫活性研究及分子量测定姓名：任爱农申请学位级别：硕士专业：药剂学指导教师：李厚兵2012-06-06江苏大学硕士学位论文摘要野菊花为菊科植物野菊(C勿侈，册砌P聊“m砌旃c“聊L．)的干燥头状花序，又称疟疾草、苦薏、山菊花等。在我国，野菊花资源非常丰富，民间药用历史悠久，但绝大部分未开发利用，现有的野菊花产品有野菊花栓、野菊花注射液、菊藻丸等。因此，开发野菊花多糖具有重要的现实意义。本论文比较系统地对野菊花多糖进行提取分离，对脱蛋白脱色素的工艺进行优选，对其免疫活性进行系统

2、研究，在此基础上对其进行分级纯化，并采用高效凝胶渗透色谱法测定其纯化组分的分子量，以期为野菊花多糖的后续化学研究及产品开发提供可靠的理论基础。主要研究内容如下：1．本论文选取提取温度、提取时间、料液比以及提取次数为考察因素，以野菊花多糖提取率为考察指标，进行单因素试验。在此基础上，采用正交设计法优选得最佳提取工艺为：提取温度90℃，提取时间1h，料液比l：32，提取次数3次，在此最佳工艺条件下野菊花多糖的提取率为16．11％，各个因素对野菊花多糖提取率的影响大小依次为：提取次数>提取温度>料液比>提取时间。2．本论文

3、采用大孔吸附树脂，探讨纯化多糖时同步去除色素和蛋白质的可行性，研究大孔吸附树脂纯化野菊花多糖的新工艺。以脱色率、蛋白质去除率和野菊花多糖保留率为指标，利用静态吸附试验筛选大孔吸附树脂，并考察温度、pH、野菊花多糖溶液质量浓度以及振荡转速对其静态吸附的影响；利用动态吸附试验，考察流速和径高比对其吸附性能的影响。使用筛选所得的大孔吸附树脂LSA．2l对野菊花多糖进行纯化的最佳工艺为：温度40℃，野菊花多糖溶液质量浓度为7mg·mL～，pH值为5，转速为180r·min-1，流速为3BV／ll，径高比1：8。通过验证试验，

4、脱色率可达80．90％，蛋白质去除率为52．84％，多糖保留率为82．59％，其纯化效果比较理想。3．本实验对脱蛋白脱色素后的野菊花多糖进行系统的免疫活性研究，利用环磷酰胺腹腔注射制备小鼠免疫功能低下模型，观察野菊花多糖对免疫功能低下小鼠碳廓清试验的影响；测定小鼠体重及胸腺、脾脏重量，计算胸腺、脾指数；采用二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应法(耳肿胀法)测定细胞免疫功能；检测血清溶血素含量。实验结果为：模型组小鼠的各项指标均显著降低俨

5、0199±O．0047，吞噬指数分别为5．3970±0．7356、4．8278±0．4801，耳肿胀度分别为5．23±O．98mg、4．89±1．10mg，血清溶血素分别为0．410±O．063、O．357±O．058，且各指标与模型组比较，均具有显著性差异(P<0．01或P<0．05)。表明，野菊花多糖的提取分离、免疫活性研究及分子量测定野菊花多糖可增强环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠的免疫功能。4．在免疫活性研究的基础上，本文对脱蛋白、脱色素后的野菊花多糖进行进一步的分级纯化，并测定其分子量，以期为野菊花多糖的后续化

6、学结构研究及产品开发提供可靠地理论基础。试验利用DEAE．52和SephadexG．50对多糖进行纯化，得到三个组分，分别命名为：CIPl、CIP2与CIP3。应用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测得其分子量分别为8383、8242和19201。关键词：野菊花多糖，提取，分离，免疫活性，纯化，分子量江苏大学硕士学位论文AbstractCh巧s锄t11锄umindicum，driednowerof劭，声口疗砌Pm“mf，z硪c“mL．belongst0meCornpos渤eCh巧s锄t11emum，commonlyca

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