nudc及信号分子mekk3和jnk对肾癌细胞迁移能力的影响

《nudc及信号分子mekk3和jnk对肾癌细胞迁移能力的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、江苏大学硕士学位论文NudC及信号分子MEKK3和JNK对肾癌细胞迁移能力的影响姓名：唐爱国申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：孙浩201206江苏大学硕士学位论文摘要研究目的(1)比较人胚肾细胞株293和肾癌细胞株OS．RC．2细胞迁移能力的差异。(2)检测上述细胞株中核迁移蛋白NudC(NucleardistributiongeneC的表达产物)、有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(mitogen—activatedproteinkinase3，MEKK3)和c-Jun氨基末端激酶(c．JunNH2-terminalkinases，J

2、NK)等信号转导分子的表达和活性，分析它们与肾癌细胞迁移活性的关系。研究方法(1)采用Transwell方法比较293和OS．RC．2两个细胞株的迁移能力。(2)采用RT-PCR方法检测MEKK3和NudCmRNA在胚肾细胞株293和肾癌细胞株OS．RC．2中的表达。(3)采用Westernblotting方法检测NudC、MEKK3、和JNK蛋白在293和OS—RC一2细胞株中的表达，p-MEKK3和p-JNK在两个细胞株的水平，以及两个细胞株的细胞核内NudC的表达差异。(4)采用免疫荧光方法检测NudC在293和OS—RC．2细胞株的

3、定位。研究结果(1)细胞迁移结果显示，肾癌细胞株OS．RC．2的迁移能力明显高于胚肾细胞株293。NudC及信号分子MEKK3和JNK对肾癌细胞迁移能力的影响(2)在mRNA水平，人肾癌细胞株OS．RC．2中MEKK3和NudC表达均明显高于人胚肾细胞株293。(3)在蛋白水平，人肾癌细胞株OS．RC．2中MEKK3和JNK的磷酸化水平均高于人胚肾细胞株293。(4)免疫荧光结果和细胞核蛋白表达结果显示NudC在人肾癌细胞株OS．RC．2的核内表达明显高于人胚肾细胞株293。结论MEKK3和JNK的磷酸化水平在肾癌细胞株OS．RC．2含量增

4、加，NudC在肾癌细胞株核内的表达明显高于正常细胞株，提示NudC以及信号相关分子MEKK3、JNK与肾癌细胞迁移性密切相关。关键词：NudC，MEKK3，JNK，肾癌，迁移江苏大学硕士学位论文objectiveABSTRACT(1)Toidentifythemigrationactivityofhumanembryonickidneycellline293andrenalcarcinomaeelllineOS．RC．2．(2)TodetecttheexpressionofNudC(NucleardistributiongeneC)，MEK

5、K3(mitogen—activatedproteinkinase3，MEKK3)andJNK(c-JunNH2-terminalkinases)andthephosphorylationofJNKinhumanembryonickidneycellline293andrenalcarcinomacelllineOS—RC-2，andthenanalyzetherelationshipofNudC，MEKK3andJNKwithmigrationactivityofrenalcancercells．Methods(1)Thetranswel

6、lmigrationassaywasappliedtoobservethemigrationactivityof293cellsandOS—RC一2cells．(2)RT-PCRwasusedtodetecttheexpressionofMEKK3andNudCinhumanembryonickidneycellline293andrenalcarcinomacelllineOS—RC．2．(3)Westernblottingwasusedtoinvestigatetheexpression／contentofNudC，MEKK3，p-ME

7、KK3andp-JNKin293cellsandOS-RC-2cells．NeucleoproteinwasextractedandtheexpressionofNudCinnucleuswasalsoanalyzed．(4)ImmunofluorescenceassaywereusedtodetectthelocalizationofNudCinhumanembryonickidneycellline293andrenalcarcinomaeelllineOS—RC．2．Results(1)Thetranswellmigrationass

8、ayindicatedthatthemigrationofNudC及信号分子MEKK3和JNK对肾癌细胞迁移能力的影响renalcarcinomacelllineOS．．RC．-