ly294002联合多柔比星对神经胶质瘤u87细胞凋亡的影响

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1、分类号R34密级UDC610硕士学位论文LY294002联合多柔比星对神经胶质瘤U87细胞凋亡的影响学位申请人：李焘学科专业：外科学指导教师：王雄伟副教授二○一二年三月ADissertationSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineEffectofLY294002combinedwithADRonapoptosisingliomaU87cellsinvitroGraduateStudent:LiTaoMajor:S

2、urgerySupervisor:Prof.WangXiongweiChinaThreeGorgesUniversityYichang,443002,P.R.ChinaMarch,2012三峡大学硕士学位论文三峡大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确方式标明，本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。学位论文作者签名：日期：三

3、峡大学研究生知识产权承诺书本人承认：我作为三峡大学硕士研究生在校学习期间，在导师指导下，依据研究工作所作学位论文的知识产权全部权归三峡大学所有。本人承诺：我有义务维护三峡大学的知识产权，凡是以我本人学位论文内的全部或部分研究成果，或实验数据为基础所形成的研究论文及成果，无论是以何种形式刊发学术论文、进行成果鉴定或申报奖励，均以三峡大学为第一作者单位或完成单位，并事先征得导师或学校相关部门的同意。我愿承担因违背上述承诺而引起的一切法津和经济后果。学位论文作者签名：日期：三峡大学硕士学位论文内容摘要目的：通过体外实验观察LY294

4、002和ADR联合应用对胶质瘤U87细胞的抑制效应，并与单纯使用LY294002或ADR的疗效相比较，从而探讨LY294002和ADR联合化疗胶质瘤U87细胞可行性，同时为LY294002和ADR在胶质瘤中的联合应用提供相应的理论依据。方法：(1)四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-Dimethyl-thiaoly)-2,5-diphenyl-2Htetrazoliumbromide,MTT]法检测LY294002和ADR单独或者联合作用胶质瘤U87细胞增殖的影响。(2)流式细胞仪检测LY294002和ADR单独或者联合作用细胞周期

5、分布及凋亡。(3)应用RT-PCR和蛋白印迹(Westernblotting,WB)法检测LY294002和ADR单独或者联合作用U87细胞Bax、Bcl-2的表达情况。(4)倒置显微镜观察用LY294002和ADR单独或者联合作用U87细胞形态变化。结果：(1)MTT、FCM结果显示，与对照组相比，LY294002和ADR单独或者联合作用对U87细胞的生长具有抑制作用，且两者联合后作用更强。(2)RT-PCR及Western-Blotting结果均显示，LY294002和ADR单独或者联合作用后，U87细胞中Bcl-2表达降

6、低而Bax表达升高，联合后更显著。(3)倒置显微镜观察用LY294002和ADR单独处理后，胶质瘤细胞逐渐减少，体积变小，胞质透亮度下降，颗粒感增强，细胞突触变短、变圆，部分细胞胞突回缩变圆，脱落呈悬浮状，而ADR+LY294002联合处理的细胞，上述变化更加显著，并可见细胞形态破坏，胞膜破裂，细胞凋亡。结论：LY294002和ADR能够抑制人胶质瘤U87细胞的增殖，两者联合使用具有协同作用。LY294002和ADR能够将人胶质瘤U87细胞阻滞在G0/G1期，两者联合使用阻滞作用增强，细胞凋亡更明显。LY294002通过促进B

7、ax、抑制Bcl-2的表达增强人胶质瘤U87细胞对ADR的敏感性。关键词：LY294002ADR人胶质瘤U87细胞细胞凋亡三峡大学硕士学位论文AbstractObjectiveToinvestigatetheeffectsofLY294002combinedwithadriamycin(ADR)onapoptosisingliomacancercelllineU87cellsinvitro,andcomparedwiththesimpleuseoftheefficacyofLY294002orADR.Soastoexplore

8、theLY294002andADRchemotherapygliomaU87cellfeasibility,whichprovidethetheoreticalbasisforthecombinationofLY294002andADRingliomaatthesametim