欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:33501914
大小:3.86 MB
页数:60页
时间:2019-02-26
《辛伐他汀对多柔比星损伤乳鼠心肌细胞钙调蛋白及凋亡的影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、江苏大学硕士学位论文辛伐他汀对多柔比星损伤乳鼠心肌细胞钙调蛋白及凋亡的影响姓名:潘建业申请学位级别:硕士专业:内科学指导教师:张国辉201206江苏大学硕士学位论文摘要目的:通过辛伐他H(SIM)对多柔比星(DOX)损伤乳鼠心肌细胞的干预,观察SIM对心肌细胞的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法:(1)实验模型:用酶消化及差速贴壁法分离、纯化、培养SD乳鼠原代心肌细胞,72小时后用终浓度为lrtmol/L的DOX作用24小时建立心肌细胞损伤模型。(2)实验分组:培养72小时的心肌细胞随机分为五组:正常对照组(C组)、DOX损伤组(D组)、lgmol/L
2、SIM干预组(A1组)、109mol/LSIM干预组(A2组)、209mol/LSIM干预组(A3组)。(3)检测指标:①倒置相差显微镜观察心肌细胞搏动频率;②四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测心肌细胞存活率;@AnnexinV-FITC流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率;④荧光染料Fluo.3/AM检测心肌细胞内钙离子荧光强度;@Westerblot检测心肌细胞肌浆网Ca2+.ATP酶(SERCA2a)和钙释放通道(RyR2)蛋白表达水平。结果:①心肌细胞搏动频率:D、A1、A2、A3组心肌细胞搏动频率分别为(35.214-10.17、57.324-6.96、65
3、.164.6.84、70.534-6.20)次/分,与C组(87.74+8.25)次/分相比,搏动频率显著减慢,均P<0.05;与D组相比,AI、A2、A3组心肌细胞搏动频率显著增快,且呈浓度依赖性,均P<0.05。②心肌细胞存活率:D、AI、A2、A3组心肌细胞存活率分别为(50.544.3.40)%、(58.754.1.64)%、(72.114-1.77)%、(77.344-4.70)%,与C组【(100%)相比,存活率.显著下降,均P<0.05:与D务i相比,Al、A2、A3鲥l心肌细胞存活率艟著升高,n呈浓度依赖性,均P<0.05。③凋亡辛伐他汀对
4、多柔比星损伤乳鼠心肌细胞钙调蛋白及凋亡的影响率:D、A1、A2、A3组心肌细胞凋亡率分别为(47.134-2.09)%、(36.644-3.23)%、(26.194-2.49)%、(24.934-2.96)%,与C组(3.02--I:1.65)%相比,凋亡率显著升高,均P<0.05;与D组相比,A1、A2、A3组心肌细胞凋亡率显著降低,且呈浓度依赖性,均P<0.05。④心肌细胞内钙离子荧光强度:D、A1、A2、A3组心肌细胞内钙荧光强度分别为(51.644-3.37)、(33.104-2.57)、(23.374-2.06)、(22.264-1.00),与C
5、组(8.334-0.73)相比,钙荧光强度显著升高,均P<0.05;与D组相比,A1、A2、A3组心肌细胞内的钙荧光强度显著降低,均P<0.05;AI组与A2、A3组之间有差异显著性(氏0.05),而A2组和A3组之间没有差异显著性p0.05)。⑤钙调蛋白的蛋白表达:D、A1、A2、A3组的SERCA2a蛋白表达分别为(0.29-土o.09)、(0.384-0.06)、(0.464-0.07)、(0.454-0.03),与C组(O.644-0.05)相比,表达显著下降,均P<0.05;D、A1、A2、A3组的I母R2蛋白表达分别为(O.195:0.06)、
6、(0.28a-0.05)、(0.324-0.07)、(0.414-0.09),与C。组(0.67+0.05)相比,表达显著下降,均P<0.05;与D组相比,A1、A2、A3组SERCA2a和l时R2蛋白表达显著上升(均P<0.05);A2组和A3组之间SERCA2a蛋白表达没有差异显著性(尸>0.05),而lql迎蛋白表达有显著性差异(尸_7、白表达与细胞内Ca2+浓度呈负相关,相关系数分别为R=--0.94和一0.86(均P<0.001)。⑧钙调蛋白的蛋白表达与凋亡率的直线相关性:心肌细胞SERCA2a、RyR2蛋白表达与凋亡率呈负相关,相关系数江苏大学硕士学位论文分别为R=--0.95和--0.93(均P<0.001)。结论:SIM能够显著减少DOX诱导的心肌细胞凋亡,提高心肌细胞存活率。其可能机制在于促进钙调蛋白SERCA2a和RyR2表达的增加,降低细胞内游离钙浓度,减轻心肌细胞内钙超载,从而减少由钙超载所导致的心肌细胞凋亡。关键词:辛伐他汀;多柔比星;心肌细胞;钙超载;肌浆网Ca2+一8、ATP酶;钙释放通道江苏大学硕士擘位论文ABSTRACTObjec
7、白表达与细胞内Ca2+浓度呈负相关,相关系数分别为R=--0.94和一0.86(均P<0.001)。⑧钙调蛋白的蛋白表达与凋亡率的直线相关性:心肌细胞SERCA2a、RyR2蛋白表达与凋亡率呈负相关,相关系数江苏大学硕士学位论文分别为R=--0.95和--0.93(均P<0.001)。结论:SIM能够显著减少DOX诱导的心肌细胞凋亡,提高心肌细胞存活率。其可能机制在于促进钙调蛋白SERCA2a和RyR2表达的增加,降低细胞内游离钙浓度,减轻心肌细胞内钙超载,从而减少由钙超载所导致的心肌细胞凋亡。关键词:辛伐他汀;多柔比星;心肌细胞;钙超载;肌浆网Ca2+一
8、ATP酶;钙释放通道江苏大学硕士擘位论文ABSTRACTObjec
此文档下载收益归作者所有