《边做边学目的dna片段的体外扩增》同步习题1

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1、《边做边学目的励片段的体外扩增》同步习题当堂双基达标1.关于PC7?的说法不正确的是（）A.PCR是体外复制DNA的技术B.帀q聚合酶是一•种热稳定的EWA聚合酶C.PCR过程中需要一个模板DN4、两个引物分子、大量脱氧核昔酸原料D.PCR利用的是DVA双链复制原理【解析】PC/?过程屮需要模板DNA,过量的寡核昔酸引物和4种脱氧核昔酸以及帀q聚合酶。【答案】C2.下列哪项不是多聚酶链式反应（PCR）扩增DNA片段的必需条件（）A.模板DNA片段和四种游离脱氧核背酸B.核糖体和DNA解旋酶C.耐热的DMA聚合酶

2、和引物D.适宜pH的缓冲溶液和自动温度控制仪器【解析】PCR反应需要在一定缓冲溶液中进行，另外，还需提供：DNA模板，分别与两条模板链相结合的两种引物，四种脱氧核昔酸，耐热的DNA聚合酶，口动温度控制仪器。通过控制温度使DWA复制在体外进行。【答案】B3.标准的PC/?过程一般分为变性、退火、延伸三大步，这三大步所需的温度依次是（）A.94°C、50°C、72°CB.72°C、50°C、92°CC.50°C、92°C、72°CD.80°C、50°C、72°C【解析】当温度上升到94°C吋，双链DN4解旋为单链，

3、称之为变性；当温度下降到40〜60°C左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链D7VA结合；当温度上升至72°C时，溶液中的四种脱氧核昔酸（A、T、C、G）在帀q聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的ZWA链，称为延伸。【答案】A4.PC7?技术中引物的作用是（）A.打开DN4双链B.催化合成DNA子链A.使DNA聚合酶能够从引物的丁端开始子链合成D.提供模板【解析】DNA分子的复制具有方向性，DV4聚合酶只能从引物的3端延伸DVA链，因此DNA的合成方冋总是从子链的5，端

4、口B端延伸。【答案】C1.下

5、面关于DN4对高温的耐受性的说法，不正确的是（）A.DNA对高温的耐受性一般要比蛋白质强B.超过80°C后DNA将变性，即使恢复到常温，生物活性也不能恢复C.不同生物的DMA的“变性”温度不一定相同D.深海热泉附近生活的生物的QN4对高温的耐受性更强，其QN4中鸟瞟吟所占的比例更高【解析】蛋白质一般不能忍受80°C以上的高温，一旦达到此温度，其结构往往会发生不可逆转的破坏，而DNA—般在80°C以上情况下才会变性，一旦温度降低，其在高温下解开的两条链又会重新结合成双链，恢复其活性。由于GC碱基对通过三个氢键相连

6、，所以更稳定。【答案】B2.PCR技术最突岀的优点是（）A.原理简单B.原料易找C.帀g聚合酶具有耐热性D.快速、高效、灵活、易于操作【解析】PCR技术用途广泛，具有快速、高效、灵活、易于操作的突出优点。【答案】D3.分析回答下列有关生物技术实践的问题：PCR是一种DNA体外扩增技术，被广泛应用于基因扩增和DNA序列测定。如图是PCR技术示意图，请回答下列问题：DNA片段——n变性〕■<■与引物结合需引物延伸丿1变性、与引物结合周期34P周期2引物延伸丿(1)标准的PCR过程一般分为、、三大步骤。(2)引物是此

7、过程中必须加入的物质，从化学本质上说，引物是一小段。(3)将双链,使Z变性，从而导致o(4)引物延伸需提供作为原料。【解析】(1)标准的PC7?过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是95°C、55°C、72°C。(2)引物是此过程中必须加入的物质，从化学本质上说，引物是一段DN4或它能与DNA母链的一段碱基序列互补配对。(3)在PCR反应过程屮，当温度上升到90°C以上时，双链DNA解聚为单链。(4)当系统温度上升到72°C左右时，溶液中的4种脱氧核昔酸(A、G、C、。在DM4聚合酶的作用

8、下，根据碱基互补配对原则合成新的链。【答案】(1)变性复性延伸(2)单链DVA或用VA(3)加热到94°C双链DNA解聚成两条单链(4)4种脱氧核昔酸1.根据教材知识，回答下列问题。⑴PCR利用了的原理，在的温度范围内，DN4的解体,开，这个过程称为o(2)PCR反应需要的条件：缓冲溶液、DNA模阪、引物、四种脱氧核昔酸、耐热的DNA聚合酶，其原因是。(3)在PCZ?反应中与解旋酶作用相同的操作是。(4)PCR一般要经过三十多次循环，每次循环可分为、和三步。(5)若扩增30次，产生DVA片段个。【解析】PCR技

9、术中，一般不采用解旋酶处理，而是采用DNA热变性处理；在95°C左右(80〜1000DNA变性，盘键断裂，双螺旋打开，类似于生物体内解旋酶的作用；产生单链后，DNA单链与引物结合，然后利用四种脱氧核昔酸，经过变性一复性一延性三个阶段,完成的扩增。【答案】(1)热变性80〜100°C双螺旋结构双链变性(2)PCR反应的本质是DNA复制，其需耍的条件类似于生物体内QM4的复制(3)95°C