ages对人肾小球系膜细胞mmp-9和timp-1表达影响

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1、万方数据目录英文缩略词表………………………………………………………………………3中文摘要……………………………………………………………………………5英文摘要……………………………………………………………………………6前言…………………………………………………………………………………8第一部分AGEs对人肾小球系膜细胞增殖的影响材料与方法…………………………………………………………………………11结果…………………………………………………………………………………15讨论……………………………………………………………

2、……………………17第二部分AGEs对人肾小球系膜细胞MMP-9、TIMP-1及RAGE、p38MAPK表达的影响材料与方法…………………………………………………………………………19结果…………………………………………………………………………………27讨论…………………………………………………………………………………36第三部分AGEs影响人肾小球系膜细胞MMP-9和TIMP-1表达的机制探讨材料与方法…………………………………………………………………………40结果……………………………………………………………

3、……………………42讨论…………………………………………………………………………………48结论…………………………………………………………………………………51参考文献……………………………………………………………………………52致谢…………………………………………………………………………………56综述…………………………………………………………………………………57万方数据英文缩略词表英文缩略英文全称中文名称DMdiabetesmellitus糖尿病DNdiabeticnephropathy糖尿病肾病ECMex

4、tracellularmatrix细胞外基质bpbasepair碱基对cDNAcomplementarydeoxynucleicacid互补脱氧核糖核酸BSAbovineserumalbumin牛血清白蛋白AGEsadvancedglycationendproducts糖基化终产物RAGEreceptorforadvancedglycationend晚期糖化终产物受体productsMAPKmitogen-activatedproteinkinase促分裂原活化蛋白激酶MMPmatrixmetalloprotei

5、nase基质金属蛋白酶TIMPtissueinhibitorofmetalloproteinase基质金属蛋白酶组织抑制因子HMCshumanmesangialcells人肾小球系膜细胞FBSfetalbovineserum胎牛血清DMSOdimethylsulfoxide二甲基亚砜ODopticaldensity光密度值PBSphosphatebufferedsaline磷酸缓冲盐溶液TrisTris(hydroxymethyl)aminomethane三羟甲基氨基甲烷TBSTrisbufferedsaline

6、Tris盐缓冲液TEMEDtetramethylethylenediamine四甲基乙二胺3万方数据MTT3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl噻唑蓝tetrazoliumbromideEDTAethylendiaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸ECLenhancedchemiluminescence增强化学发光法DEPCdiethylpyrocarbonate二乙基焦磷酰胺PMSFphenylmethanesulfonylfluoride苯甲基磺酰氟

7、APSammoniumpersulfate过硫酸铵SDSsodiumdodecylsulfate十二烷基磺酸钠PAGEpolyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳RT-PCRreversetranscription-polymerasechain逆转录聚合酶链反应reaction4万方数据AGEs对人肾小球系膜细胞MMP-9和TIMP-1表达的影响摘要目的:探讨糖基化终产物(AGEs)致糖尿病肾病(DN)系膜细胞外基质积聚的可能机制。方法:体外培养人肾小球系膜细胞(HMCs)

8、,分别用不同浓度的AGEs作用相同时间或相同浓度的AGEs作用不同时间,MTT法测定各组系膜细胞的增殖情况;采用RT-PCR法和Westernblot分别检测MMP-9、TIMP-1mRNA和蛋白的表达,同时观察AGEs作用下细胞膜上RAGE的表达以及p38MAPK磷酸化水平表达的变化;加入不同浓度的中和性抗RAGE抗体及p38MAPK特异性抑制剂SB203580预处理系

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