糖基化终产物对人肾小球系膜细胞半乳糖凝集素3基因表达的影响

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1、糖基化终产物对人肾小球系膜细胞半乳糖凝集素3基因表达的影响作者：马婵娟，孙子林，金晖，杨涛，杨益宁［摘要］　　目的：研究糖基化终产物（AGEs）对人肾小球系膜细胞半乳糖凝集素3(galectin3)表达的影响。方法：将培养的人肾小球系膜细胞(HRMC)用不同浓度(50、100、200及400mg・L-1)的AGEs干预24h或同一浓度(200mg・L-1)的AGEs干预0、24、48及72h，以无血清培养基(DMEM)和相应浓度的牛血清白蛋白（BSA）为对照。用RTPCR检测细胞中半乳糖凝集素3的mRNA水平。结果：不同浓度A

2、GEs组HRMC的半乳糖凝集素3mRNA水平与对照组相比均有显著差异（P＜0.01），且随着AGEs浓度的增高，半乳糖凝集素3mRNA水平也逐渐增高(P＜0.05)；AGEs干预HRMC24、48、72h，半乳糖凝集素3mRNA水平与对照组相比有显著差异（P＜0.05），且随着干预时间的延长，半乳糖凝集素3mRNA水平也逐渐增高(P＜0.01)。结论：AGEs以时间及剂量依赖的方式促进HRMC半乳糖凝集素3mRNA的表达。　　［关键词］糖基化终产物；人肾小球系膜细胞；糖尿病肾病；半乳糖凝集素3；基因表达　　Abstract：ObjectiveTostud

3、ytheeffectofadvancedglycationendproducts(AGEs)ontheexpressionofgalectin3inculturedhumanrenalmesangialcells(HRMC).MethodsTheAGEsBSAalbumin(BSA)econcentrationofBSAandAGEsBSA(50,100,200,400mg・L-1)for24hor200mg・L-1AGEsBSAfor0,24,48or72hrespectively.ThemRNAexpressionofga

4、lectin3inHRMCRNAincellsincubatedg・L-1AGEsBSArespectivelyfor24h（P＜0.01）org・L-1AGEsBSAfor0,24,48or72hrespectively（P＜0.05）increasedsignificantly.Moreover,e（P＜0.01）,thelevelofgalectin3mRNAincreased.ConclusionTheAGEsBSAcanstimulatetheexpressionofgalectin3inculturedHRMCin

5、aconcentrationandtimedependentmanner.　　Keyanrenalmesangialcells;diabeticnephropathy;galectin3;geneexpression　　糖尿病肾病(diabeticnephropathy,DN)是1、2型糖尿病的慢性微血管并发症之一，是引起终末期肾病的最常见病因［1］。大量研究表明，糖基化终产物（advancedglycationendproducts,AGEs）在DN的发生发展过程中起了重要的作用［2］。AGEs致病的主要机制之一是其可以与细胞表面的AGEs受体相互作用

6、，引发生物学效应。半乳糖凝集素3（galectin3）是AGEs的受体之一［3］，它(AGER3)与p60(AGER1)、p90（AGER2）被认为作为一个分子复合体（AGE受体复合体）起作用。本实验应用体外制备的AGEs对人肾小球系膜细胞（humanrenalmesangialcell，HRMC）进行干预，观察HRMC半乳糖凝集素3基因表达的改变。　　1材料和方法　　1.1材料　　牛血清白蛋白(bovineserumalbumin，BSA，AMRESCO产品)；D葡萄糖(分析纯，重庆北培化学试剂厂产品)；HRMC株为TSV40及Hras原癌基因转染的永

7、生系，保持了正常HRMC基本的形态学和生物学特性，由阮雄中博士（RenalUnit，RoyalFreeHospital，LONDON，UK）惠赠；无血清培养基（DMEM）、HEPES为GIBCO公司产品；小牛血清为杭州四季青生物工程材料有限公司产品；TRIZOL、RTPCR试剂盒（RevertAidTMFirstStrandcDNASynthesis）、DNAMarkerSM0241（80、100、200、300、400、500、600、700、800、900、1031bp）、Taq酶均购自Fermentas公司；半乳糖凝集素3及βactin引物由上海申

8、能博彩生物工程公司合成；琼脂糖（电泳级）购自MDBio公司。　　1.2方法　　1