重组植物甜蛋白马宾灵的食品级乳酸乳球菌诱导表达系统的构

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1、中国农学通报2012,28(30):196-200ChineseAgriculturalScienceBulletin重组植物甜蛋白马宾灵的食品级乳酸乳球菌诱导表达系统的构建121122顾文亮，夏启玉，姚晶，胡新文，符少萍，郭建春（1海南大学农学院，海口570228；2中国热带农业科学院热带生物技术研究所，海口571101）摘要：为了将马宾灵(MabinlinⅡ)直接应用于功能性食品中，通过对MabinlinⅡ基因进行有目的的剪切重组，将重组MabinlinⅡ基因插入到食品级表达载体中，经电击转化和乳糖筛选获得重组的食品级乳酸乳球菌，构建了重组植物甜蛋白马宾灵(MBL-ABH)的食品级乳酸乳

2、球菌诱导表达系统。结果表明，该食品级诱导表达系统经乳酸链球菌素(Nisin)诱导后所表达的目的蛋白的含量较低，Western-blot检测表明MBL-ABH成功的在食品级乳酸乳球菌中表达。本研究扩展了植物甜蛋白马宾灵在食品方面的应用，有望开发出能够避免添加食糖类物质的功能性食品。关键词：植物甜蛋白；马槟榔；马宾灵；乳酸乳球菌；蛋白表达中图分类号：Q812文献标志码：A论文编号：2012-0407ConstructionofFood-gradeInducibleExpressionSystemforRecombinantPlantSweetProteinMabinlinⅡinLactococc

3、uslactis121122GuWenliang,XiaQiyu,YaoJing,HuXinwen,FuShaoping,GuoJianchun(1CollegeofAgriculture,HainanUniversity,Haikou570228;2InstituteofTropicalBioscienceandBiotechnology,ChineseAcademyofTropicalAgriculturalSciences,Haikou571101)Abstract:Inthisstudy,inordertodirectlyuseMabinlinⅡinfunctionalfood,th

4、eMabinlinⅡgenewasreconstructedandthentherecombinantMabinlinⅡgenewasinsertedintothefood-gradeexpressionvector.Afterelectroporationandlactoseutilizationscreening,thefood-gradeinducibleexpressionsystemforrecombinantplantsweetproteinMabinlinⅡinL.lactiswasconstructed.Theexpressionoftheinducedrecombinant

5、MabinlinⅡwasinalowlevel.ThewesternblottingresultsdemonstratedthattherecombinantMabinlinⅡproteinwassuccessfullyexpressedbytherecombinantfood-gradeL.lactiswhentheinducibleexpressionsystemwasinducedbyNisin.Thisresearchshowedthefeasibilityofconstructingafood-gradeL.lactisdairyproductstrategybyremovingt

6、heneedforadditionofsugarandcontributingtothevalueoffunctionalfood.Keywords:plantsweetprotein;CapparismasaikaiLévl;MabinlinⅡ;Lactococcuslactis;proteinexpression[2][3]0引言甜蛋白。MabinlinⅡ来源于植物马槟榔的种子，经目前全世界一共发现有7种植物甜味蛋白及矫味研究发现在马槟榔种子中存在4种马宾灵同系物蛋[1]蛋白，马宾灵(MabinlinⅡ)是唯一在中国发现的植物白，而其中仅MabinlinⅡ具有最佳的热稳定性也研究基金项目

7、：国家自然科学基金“马宾灵基因(Mabinlin)体外甜味表达及其结构发生规律研究”(31060123)。第一作者简介：顾文亮，男，1984年出生，湖北黄石人，博士研究生，主要从事植物分子遗传学方面的研究。通信地址：571101海南省海口市龙华区学院路4号热带生物技术研究所，Tel：0898-66987535，E-mail：gwl84@126.com。通讯作者：郭建春，女，1965年出生，湖南桃江人，研究员，