胶束毛细管电动色谱用于柱前衍生氨基酸的分离研究论文

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1、南京工业大学硕士学位论文胶束毛细管电动色谱用于柱前衍生氨基酸的分离研究姓名：葛佳璐申请学位级别：硕士专业：生物化工指导教师：屠春燕200805堡主堂垡垒茎Ⅷ⋯llllIlfIff删帅lffffⅢ圳IIlIIⅢ一-___-______·I-__l--___-_--_____--·-I-。‘。-_--·__-__o_-_-·--______--___·__·___l---__-______--_----。·-。-一’●■■-■-■⋯■．

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3、Y2083450摘要氨基酸是生命有机体的重要组成部分，其分离分析已成为研究的热点之一。衍生法与色谱法结合具有高灵敏度、低检测限和简便可靠等特点，在氨基酸生物学研究中将倍受重视。在毛细管电泳(CE)的模式中，胶束毛细管电泳(MEKC)具有分离中性物质的能力，其分离能力的改善主要依靠缓冲溶液组成和性质。多种表面活性剂和添加剂的运用与修饰，使得MEKC在生物、化学、医药、食品等领域中获得了广泛的应用。本论文围绕胶束毛细管电泳，采用三种新型柱前衍生试剂，开展了氨基酸衍生产物的胶束毛细管电泳方法研究，主要取得

4、了以下几方面创新性成果：1、采用一种新型标记试剂N一乙酰苯磺酰氟作为氨基酸柱前衍生试剂，进行了衍生条件的优化，研究以硼砂．碱s二元缓冲体系为背景电解液，考察了缓冲液的pH值和离子强度、表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)浓度、有机改性剂种类及分离电压等几个关键条件的影响，实验结果：采用40nuIlol·L．1硼砂．嘶s(1：1)缓冲液(pH9．3)、添加140mmol·L．1的SDS、5％甲醇及lOmmol·L．1三乙胺作为最适分离体系，建立了以硼砂．嘶s为背景电解液分离16种N．乙酰氨基苯磺酰氟氨基

5、酸衍生物的毛细管电泳新方法；2、采用一种新型标记试剂邻硝基苯磺酰氯作为柱前衍生试剂，在毛细管胶束电动色谱中引入SDS和手性表面活性剂脱氧胆酸钠SDC混合型胶束的作用模式，建立了分离20种氨基酸衍生物的新方法。研究以硼砂缓冲体系为背景电解液，考察了缓冲液的pH值和离子强度、SDS和SDC的浓度及有机改性剂甲醇的含量等几个关键因素的影响，实验结果表明：采用50I姗ol·L-1硼砂缓冲液(pH9．0)、140mmol·L-1的SDS、20mmol·L-1的SDC、lOmmol·L-1NaCl及7％甲醇作为

6、最适分离体系，20种邻硝基苯磺酰氯氨基酸衍生物达到基线分离：3、采用对甲基苯磺酰氯作为柱前衍生试剂，利用SDC在胶束电动毛细管中与SDS的协同作用，建立了毛细管胶束电动色谱用于氨基酸衍生产物的分离新方法。实验结果表明：采用40mmol·L-1硼砂缓冲液(pH9．0)、140mmol·L．1的SDS、20mm01．L．1的SDC及7％甲醇的分离条件可使20种对甲基苯磺酰氯氨基酸衍生摘要物基线分离；4、建立了D．y．谷氨酰．色氨酸合成体系，绿豆蛋白酶解液的水解产物体系，以及玉米浆发酵液体系中氨基酸分析物

7、的定性定量HPCE检测的新方法，证明了该种毛细管胶束电动色谱新模式下分离检测氨基酸类样品的可行性和适用性。关键词：氨基酸衍生MEKC分离lI硕士学位论文ABSTRACTAmin0acidsareilllportantcomponentsoflifeo唱锄isms，sothe陀search0fmeirseparation觚d锄alysisbecomepopul犹Thechromato铲aphycombinedwimderiVationaremo陀iIllport锄tbec卸seofmanycharac

8、teristics，such弱hi曲-sensitiVi坝lowdetectionlimitaIldcredibili吼Micell盯elec仃okineticchromatoFaphy(MEKC)c趾achieVet11ea11alysisofneu仃al锄alytes弱oneofthemostimport觚tmodesofcapilla巧elec仃phoresis．TheseparationabilityofMEKCw弱detemilledbythebufrercomponents锄dprope

9、rties．Becausealotofsurfact觚ts锄dadditiVeswereusedintheM[EKC，sotllatitiswidelyusedinbiochemis臼以mediciIle，food，eta1．Thisdissertationfocused0nmedeVelopment孤d印plicationofMEKCmemodsfor锄in0aCidderiVations．Intllisarticles，wehaveca丌iedoutsomeori