胶束毛细管电动色谱分离分析几类中药活性成分的研究

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1、扉页：独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人或集体已经发表或撰写过的研究成果，对本文的研究做出贡献的集体和个人均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：亟拭兰日期：巡!玉：6：三论文使用和授权说明本人完全了解云南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文和论文电子版；允许论文被查阅或借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。(保密的论文在解密后应遵循此规定)研究生签名：立丑拉茑导师签名：监遮日期：塑!兰

2、：芝；本人及导师同意将学位论文提交至清华大学“中国学术期刊(光盘版)电子杂志社"进行电子和网络出版，并编入CWKI系列数据库，传播本学位论文的全部或部分内容，同意按《中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。研究生签名：盟扭巷导师签名：遵墼亟日中文摘要毛细管胶束电动色谱法(ⅧCC)是一种重要的毛细管电泳(CE)分离技术，由于在运行电解质溶液中加入表面活性剂形成胶束准固定相，MECC不仅可以用于分离带电物质，还可以分离电中性分子，并且具有高效、高选择性、高灵敏度、操作简单、经济和易于清洗等优点，被广泛用于药物分析、食品与环境监测和生命科学等领域。本文归纳总结了MECC的分离

3、原理及其影响因素，并系统综述了近年来MECC在中药活性成分分析中的研究进展。在此基础上，运用MECC技术，建立了4个同时分离分析中药活性成分的新方法，研究工作的具体内容如下：l、采用十二烷基硫酸钠(SDS)和吐温．20(Tween．20)混合胶束体系，建立了同时分离测定龙血竭中龙血素A、龙血素B和剑叶龙血素C的毛细管胶束电动色谱法。实验在考查了样品溶剂的组成和电泳缓冲溶液的pH值、浓度、Tween．20和SDS含量以及仪器条件对分离的影响后，选定的电泳条件为：样品以运行缓冲溶液溶解后采用压力(0．5psi，3447．38Pa)进样5．0s，然后在20kV的分离电压、25。C的柱温和206n

4、m的检测波长下，以含有22．5mmol／LSDS和0．35％(v／v)Tween．20的硼砂缓冲溶液(硼砂浓度为20mmol／L，pH9．98)为运行缓冲溶液进行电泳。该方法可以在18min实现3个待测组分的基线分离，而且重现性好、灵敏度高、线性范围。龙血素A、龙血素B和剑叶龙血素C的检测范围分别为2．0～100．0rtg／mL、2．0-100．0I-tg／mL和5．0-80．0ptg／mL。用此方法测定不同来源血竭样品中这3种组分的含量，相对标准偏差均在5．0％以内，回收率在95．1N103．2％之间。此外，实验还采用区带电泳模式，测定得到了龙血素A和龙血素B的离解常数分别为8．32和8

5、．36。2、以含有20mmol／LSDS的体积比为l：l的甲醇．水为样品溶剂，含有32．5mmol／LSDS、1．2％(v／v)Tween一20和30％(v／v)甲醇的硼砂缓冲溶液(硼砂浓度为20mmol／L，pH9．11)为运行电解质溶液，在24kV的运行电压、25。C的毛细管柱温、211ntn的检测波长下，建立了一个未见文献报道的分离测定白芷中5个香豆素成分(欧前胡素、异欧前胡素、氧化前胡素、比克白芷素和比克白芷醚)的SDS．Tween．20混合胶束毛细管电动色谱法。该方法可以在30min内实现样品溶液中这5个组分的分离与检测，检测的线性范围对于欧前胡素、异欧前胡素、氧化前胡素、比克白

6、芷素和比克白芷醚分别为3．0～90．0I．tg／mL、1．0-90．0I．tg／mL、1．5-110．0}tg／mL、1．0-110．0}tg／mL和2．0N100．0}tg／mL。T中文摘要用此方法分析了中药白芷中这5种组分的含量，测定结果的相对标准偏差均在5．O％以内，回收率在95．9～104．4％之间，表明该方法精密度好且准确度高，结果可信。3、建立了同时分离分析五味子中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素和五味子丙素的13-CD协同胶束毛细管电动色谱法。在选定的电泳条件(以含有10mmol／LSDS的体积比为1：l的甲醇．水为样品溶剂，含有17．5mmol／LSDS、9m

7、mol／L13．CD和14％(v／v)乙腈的20mmol／L硼砂缓冲溶液(pH8．92)为运行缓冲溶液，24kV为运行电压，25。C为柱温，220nln为检测波长，采用压力(0．5psi，3447．38Pa)进样5．0s)下，5个木脂素成分达到了基线分离。该方法对五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素和五味子丙素的检测范围分别为3．5—75．0I-tg／mL、1．0—75．0I-tg／mL、2．0—50．099／