针对gg基因的牛传染性鼻气管炎病毒新型检测方法的建立和应用

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1、针对gG基因的牛传染性鼻气管炎病毒新型检测方法建立和应用将纯化的牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)免疫BALB／c小鼠，分离免疫小鼠的脾细胞，与SP2／o细胞融合，经问接ELISA筛选，得到了3D6，1E8和1F4三株可以稳定分泌抗IBRv．gG特异性单抗的杂交瘤细胞株，用纯化的IBRV免疫新西兰大白兔，按常规方法制备IBRV多抗。选用抗gG单抗3D6株包被EUSA板，用兔抗IBRV多抗作为捕获抗体，建立了IBRV双抗体夹心ELISA检测方法。用该ELISA方法分别检测IBRV、牛分支杆菌、牛支原体、牛病毒性腹

2、泻病毒、牛合胞体病毒、牛副流感病毒3型。结果表明，该ELISA方法具有良好的特异性。5．牛传染性鼻气管炎病毒IBRv．gG抗体检测竞争ELISA方法的建立用牛传染性鼻气管炎病毒gG基因片段原核表达产物免疫小鼠制备单抗，并利用表达蛋白和辣根过氧化物酶(Ⅷ冲)标记的单抗3D6建立了竞争ELISA，旨在检测IBRV抗体。经实验确定抗原包被浓度为500n咖L，待检血清最佳稀释度l：160，酶标单抗3D6工作浓度1：2000，牛传染性鼻气管炎疫苗免疫效果的评价及流行病学调查方面具有应用价值。关键词：牛传染性鼻气管炎病毒

3、；gG基因；PCR；单克隆抗体；夹心ELISA：竞争EI．TSAn华中农业大学2011硕士学位论文Abs仃actII血c廿。潞boviI圮rhin咖cheitis(mR)iSca晒edbyinl‰tiousbovillc玎hjno仃aclleitis诎1lses(IBRⅥ觚dkn0、Ⅳn蹦liIlly觞锄∞ute，py戚c觚dcontagio璐disea∞ofresp妇t0巧仃actWIlichischa雠锄rizcdbyrbjno缸∞heitis，c0坷mlc缸Vitis，feVer，灿rtion趾dill

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