胰岛素控制下糖尿病大鼠功能性下颌前伸后髁突软骨的变化

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1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。研究生签磅磁导师签妒学院领导躲W矽2年；月≥f日研究生学位论文独创性声明圈本论文是在导师指导F进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教

2、师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名∥参嚷萄导师签色密己i护9年弓月弓7El中文摘要胰岛素控制下糖尿病大鼠功能性下颌前伸后髁突软骨的变化摘要目的：通过动物实验研究探，讨胰岛素控制下糖尿病大鼠功能性下颌前伸对颞下颌关节髁突软骨改建的影响，为寻求临床上能否为糖尿病患者进行正畸功能矫治提供科学的实验依据与理论基础。方法：1选择体重50"'609的雄性3周龄SD大鼠120只，随机分为三组，每组40只，即正常对照组(A组)，糖尿病组(B组)，胰岛素治疗组(C组)；每组再随机分为五小组，每小组8只，即O天、7天、14天、2l天、30天组。B组、C组大鼠按8

3、5mg／Kg体重腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备1型糖尿病模型，A组给予同等剂量的柠檬酸缓冲液腹腔注射。于注射72小时后尾静脉取血，留取尿液标本，分别测定血糖、尿糖，以血糖>16．8mmol／L，尿糖(卅～抖抖)，确定为糖尿病大鼠。从造模成功后第四天开始，C组给予胰岛素颈背部皮下注射0"4U／天以控制血糖，根据血糖尿糖情况调整用量，使随机血糖范围为8．10mmol／L。A组、B组给予同等剂量的生理盐水注射。糖尿病模型成模10天后各组大鼠上装置，以3％戊巴比妥钠腹腔注射全麻下，上中切牙粘固矫治器。矫治器由上切牙冠套和斜面导板组成，斜面导板向舌侧倾斜，与颌平面成250角，

4、就位粘固后，下切牙恰位于斜面导板唇面，且咬合时滑行至对刃或反颌关系，引导下颌前伸磨牙无咬合。所有大鼠均自由饮水和摄食，饲中文摘要料为河北医科大学实验动物中心配制的全价颗粒饲料，戴用矫治器后进食清水泡软的饲料。矫治器24小时戴用，戴用期间严密监控大鼠的矫治器，如有损坏和脱落，及时戴用新矫治器。2血糖测定：B、C组实验过程中每天测定一次血糖，连续三次血糖不达标的大鼠被剔除。处死前再次取血测定血糖，B组血糖>16．8mmol／L，C组血糖<10mmol／L的大鼠作为实验结果测定对象。3髁突组织切片制备：分别于粘固矫治器后O天、7天、14天、21天、30天将各小组血糖达标的大

5、鼠全麻下心脏放血处死。分别取双侧髁突，经4％多聚甲醛40C固定72小时后，用7％EDTA(乙二胺四乙酸二钠)脱钙三周后，常规脱水，包埋，经髁突正中矢状面作矢状连续切片，厚约69m。经常规HE染色和胶原及酸性粘多糖组织化学染色，观察大鼠功能矫治后髁突软骨改建情况。应用免疫组织化学方法探测TGF．6l和VEGF在髁突软骨中的含量及分布变化情况。结果：1HE染色切片观察：A、B和C组髁突软骨后份软骨厚度均增加。A组软骨厚度与C组无明显差别，A、C组软骨厚度大于B组。其中增殖层面积增加最明显，肥大层和钙化软骨层也有不同程度的增加，纤维层无明显改变。厚度在增殖层最早发生变化。各

6、层软骨厚度的变化以实验二周和三周最为明显。A、B和C组髁突软骨前份软骨厚度均减小。A组软骨厚度与C组无明显差别，B组软骨厚度明显小于A、C组。增殖层最早发生变化，但厚度变化集中在肥大层和钙化软骨层，面积明显减少，增殖层减少幅度弱于肥大层和钙化软骨2主查塑墨层，纤维层无明显改变。各组软骨厚度以实验第三周和第四周变化最为明显。2胶原染色结果观察：A组、B组和C组髁突软骨各层均有胶原蓝绿色染色，并且在纤维层、肥大层的染色最深。0天、l周、2周时胶原染色有逐渐减弱趋势，各组间无显著差异。A组、C组3周时增殖层，肥大层和钙化软骨层胶原染色变浅为淡绿色，A、C组间染色强度无明显差

7、异；B组3周时各软骨层胶原染色强度较A，C组减弱更明显。4周时A组肥大层和钙化软骨层胶原染色有加深趋势。C组肥大层胶原染色有加深趋势，其余各层无明显变化。B组各层染色无加深趋势，较3周时无明显变化。3酸性粘多糖染色结果观察：A组、B组和C组酸性粘多糖染色主要见于基质中，呈蓝色，较多集中在肥大层。由增殖层到钙化软骨层基质阳性反应逐渐增强，骨小梁亦呈阳性反应。0天、l周、2周时染色呈减弱趋势，各组间无显著差异。3周时A组，C组增殖层、肥大层和钙化软骨层染色变淡，分布不均，蓝染区域减少。A、C组间无显著差异。B组各层软骨染色强度弱于A、C组。4周时A组增殖