功能性矫治器引导大鼠下颌前伸后咀嚼肌基质金属蛋白

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1、功能性矫治器引导大鼠下颌前伸后咀嚼肌基质金属蛋白【关键词】咀嚼肌摘要：目的研究功能性矫治器引导大鼠下颌前伸后咀嚼肌中基质金属蛋白酶(MMPs)mRNA的表达，探讨功能性颌骨矫形过程中咀嚼肌适应性变化的生物学机制，为矫形治疗提供新的理论依据。方法分别采用RTPCR法、实时荧光定量PCR方法观察戴矫治器(实验组)和不戴矫治器(对照组)3、7、14、21d大鼠二腹肌前腹中MMP2、MMP9mRNA表达和表达差异。结果①实验组和对照组大鼠二腹肌前腹中MMP2、MMP9mRNA均有表达。②MMP2mRNA、MMP9mRNA表达差异：实验组

2、3、21d后表达增加，其中21d较14、7d表达明显增加；而对照组21d较14、3d表达明显增加。结论①MMP2、MMP9在mRNA水平参与了咀嚼肌正常的生长发育过程；②功能性矫治器引导大鼠下颌前伸后咀嚼肌中MMPs在mRNA水平参与了咀嚼肌的适应性变化。　　关键词：咀嚼肌；基质金属蛋白酶；mRNA；下颌前伸；RTPCR　　ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatemolecularchangesingroasticatorymuscleafterfunctionalmandibularprotrusion.

3、MethodsSDratslydividedintoeightgroupsascontrol3d,7d,14d,21dandexperimental3d,7d,14d,21d.TheRTPCRandqPCRmethodsRNAofMMPsingroasticatorymuscleafterfunctionalmandibularprotrusion.Results①ExpressionofMMP2,MMP9mRNAexpressedinallgroasticatorymuscle.②Expressiondifferencesof

4、MMP2andMMP9mRNAin3d,21dentalgroupsafterfunctionalmandibularprotrusion.Conclusion①MMP2andMMP9mRNAparticipateinmasticatorymusclenormaldevelopment.②MMPsmRNAinvolvechangesingroasticatorymuscleafterfunctionalmandibularprotrusion.　　KEYMPs;mRNA;mandibularprotrusion;RTPCR　　下

5、颌骨的功能性矫形治疗是在生长发育期通过刺激患者的下颌骨生长达到矫治下颌骨发育不足畸形目的。在引导下颌前伸的过程中，除了骨组织在肌张力的作用下发生改建和生长外，咀嚼肌也会发生相应的变化和改建，以保持和稳定下颌骨生长的结果。近些年来，功能性矫治器的研究多集中在下颌骨的改建和生长上，特别是髁状突的适应性改建及其影响因素，而对咀嚼肌功能的适应性变化研究较少，对咀嚼肌适应性改变的生物学机制尚不清楚。　　本研究通过检测功能性矫治器引导大鼠下颌前伸后咀嚼肌中基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase,MMPs)mRNA的表

6、达和表达差异，探讨功能性颌骨矫形过程中咀嚼肌适应性变化的生物学机制，为矫形治疗提供新的理论依据。　　1材料与方法　　1.1实验动物及分组选用健康的雄性SD大鼠40只，4周龄，体质量(70土5)g。随机分为8组：不戴矫治器的对照3、7、14、21d组，戴矫治器的实验3、7、14、21d组，每组5只。自由饮水，定时摄食。　　1.2主要试剂RNA提取试剂(Trizol)、反转录试剂盒(RevertAidFirstStrandcDNASynthesisKit)：MBIFermentas公司；PCRMasterMix：北京天为时代科技有限

7、公司；DyNamoSYBRGreenqPCRKit(Finnezyme)：东盛创新生物公司赠。　　1.3矫治器的设计参照Petrovic[1]使用的矫治器并加以改良。矫治器由塑料底板、斜面导板和口外固位臂三部分组成。斜面导板为6mm×8mm的带环片，斜面导板与上颌咬合平面成20°-25°，矫治器戴于大鼠上切牙。当大鼠闭口进行功能运动时，下切牙咬在斜面导板上，下颌被引导前伸。　　1.4标本制备分别于戴矫治器3，7，14，21d后断颈处死。取实验组和对照组大鼠二腹肌前腹置于有RNALater液的DEPC处理的EP管中，迅速置于液氮罐

8、中，于每次标本收集结束时移于-80℃冰箱保存。　　1.5二步法RTPCR提取总RNA，逆转录合成cDNA第一链，分别按说明书进行。引物设计合成：MMP2上游引物：5’CTATTCTGTCAGCACTTTGG3′，下游引物：5′CAGACTTTGGTTCTCCAA