超声破坏lhrh靶向微泡联合紫杉醇治疗卵巢癌的实验的研究

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1、墨鏖堕型奎兰堡主翌壅竺兰竺笙苎超声破坏LHPd-I靶向微泡联合紫杉醇治疗卵巢癌的实验研究摘要第一部分LHRH靶向卵巢癌的脂质微泡制备与鉴定目的：用共价结合法制备人卵巢癌靶向超声造影剂(TUCA)即LHRH—LM，并在体外培养卵巢癌细胞Ovcar3上观察体外寻靶作用方法：己二酸COOH．(CH2)4．COOH作为媒介，利用胺基羧基发生缩合反应的共价结合原理将LHRH粘附于NH2．LM上，制备成LHRH．LM即人卵巢癌TUCA。通过免疫荧光法，与卵巢癌细胞株Ovcar3结合的体外寻靶法鉴定。并通过LHRH阻断试验再次验证Ovear3上有LHRH的受体。用马尔文激光粒径测量仪

2、测量TUCA粒径大小及电位。结果：制备的TUCA荧光免疫试验阳性，体外寻靶试验显示TUCA能较好的黏附在Ovcar3细胞上，经反复洗涤不掉，而作为对照的LM与Ovcar3细胞株混合反应后经反复洗涤，微泡与细胞完全分离，无结合。且LHRH成功阻断TUCA与Ovcar3的结合。TUCA的粒径为4179．2nm，电位．24．9mv。结论：采用共价结合法成功制备了靶向超声造影剂，该造影剂在体外能高效地与人卵巢癌细胞株Ovcar-3结合。重庆医科大学硕士研究生学位论文’关键词：靶向超声造影剂，卵巢癌，LHRH第二部分超声破坏LHRH靶向脂质微泡联合紫杉醇对卵巢癌细胞ovcar3的

3、增殖、凋亡及细胞内药物浓度的影响目的：从细胞增殖和凋亡及细胞内药物浓度，观察靶向微泡协同紫杉醇联合超声辐照对Ovcar3细胞的抑制增殖和诱导凋亡作用和细胞内药物浓度的上调影响。，方法：通过MTT比色法选择紫杉醇对Ovcar3，细胞体外治疗浓度，然后检测靶向微泡协同紫杉醇联合超声辐照后卵巢癌Ovcar3细胞的增殖能力；采用FCM法测诱导凋亡率；采用HPLC法检测靶向微泡协同紫杉醇联合超声辐照对卵巢癌Ovcar3细胞作用后细胞内紫杉醇药物浓度的改变。结果：紫杉醇对Ovcar3细胞体外治疗的有效浓度是10．6mol／L；靶向微泡协同紫杉醇联合超声辐照Ovcar3细胞具有更明显

4、的抗增殖能力和诱导细胞凋亡能力。且使细胞内药物浓度明显增加。结论：TUCA协同紫杉醇联合超声辐照不仅能抑制卵巢癌Ovcar3细胞增殖，还有诱导其凋亡的作用，并能使其细胞内药物浓度上调。关键词：超声，靶向超声造影剂，紫杉醇，卵巢癌，OVCAR3，细胞凋亡，细胞内药物浓度3重庆医科大学硕士研究生学位论文THESTUDYOFULTRASoUNDDESTRUCTIoNLHRHTARGETEDMICRoBUBBLESCoMBINEDPACLITAXELTREATMENToVARIANCANCERABSTRACTPARTIPREPARATIoNANDoBSERVATIoNoFTAR

5、GETEDABILITYoFLIPoSoMEMICRoBUBBLESTARGETEDHUMANoVARIANCANCERCELLLINEoVCAR-3INVITRoObjective：Topreparehumanovariancancer--targetedliposomemicrobubblesandassessitstargetedabilityinvitro．Methods：ligandLHRHwasattachedtothesurfaceofself-madeliposomemicrobubblesbycovalentbondingtopreparetarget

6、edmicrobubbles．ImmunofluorescentstainingassayWasusedtoidentifythecombinationofLHRHwithliposomemicrobubblesandthetargetedmicrobubbleswereaddedtoovariancancercellsovcar-3andthenobservedunderthelightandfluorescencemicroscopetoevaluatethetargetingabilityofthetargetedpaclitaxelliposomemicrobu

7、bbleswithovariancancercellsinvitro，whilethecommonliposomemicrobubbleswerecontrols．Anduse4‘重庆医科大学硕士研究生学位论文LHRHtodoablockexperiment．Results：Targetedmicrobubbleswerepositiveinimmunofluorescentstrainingassay．Invitrostudyofthetargetingabilityshowedthetargetedmicrobubblescoulda