rhoa对肝癌细胞迁移影响的初步实验的研究

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2、lendiaminotetraeeticacidFetalbovineserumGreenfluorecenceproteinGuanosinediphophateGuanosinetriphophateHourHematine-eosinHorseradishperoxidaseKanamycinKilodaltonProteinKinaseALuria-bertainmediumLysophosphatidicacidMinuteMilliliter3‘(4，5-dimethylthiazol一2-y1)-2。5

3、·diphenyltetrazoliumbromide中文全称碱基对牛血清白蛋白环磷腺甘二氨基联苯胺焦磷酸二乙酯DMEM培养基二甲基亚砜溴化乙锭乙二氨四乙酸胎牛血清绿色荧光蛋白二磷酸鸟苷三磷酸鸟苷小时苏木精和伊红辣根过氧化物酶卡那霉素千道尔顿蛋白激酶ALB培养基溶血磷脂酸分钟毫升四甲基偶氮唑盐重庆医科大学硕士研究生学位论文NCPBSRODrpmSABCSDSNitroccllulosePhosphatebufferedsalineRelativeopficaldensityRevolutionsPerminuteSt

4、reptAvidin--BiotinComplexSodiumdodecylsulfate2硝酸纤维素磷酸盐缓冲液相对光密度每分钟转速链霉亲和素．生物素复合物十二烷基磺酸钠秒重庆医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果．据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他入已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡猷均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请

5、学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任．学位论文作者签名：赳学位论文版权使用授权书本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期闻论文工作的知识产权单位属重庆医科大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅．学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，可以采用影印．缩印或其他手段保存论文．论文作者签名：指导教师签名：日羡谚仲重庆医科大学硕士研究生学位论文RhoA对

6、肝癌细胞迁移影响的初步实验研究摘要肝癌是我国常见的高发恶性肿瘤，其发生发展是一个多因素、多步骤和多基因参与的过程。迁移性和侵入性是癌细胞的重要生物学特性，了解癌细胞迁移的机制，将为控制癌细胞迁移扩散及癌症的治疗提供新的思路和方法。RhoA是近年来新发现的与多种恶性肿瘤密切相关的癌基因，RhoA属于Rho亚家族，是ras基因超家族的一员，其编码产物RhoA蛋白属于小分子量GTP结合蛋白族(小G蛋白)，分为GTP结合的活性型和GDP结合的非活性型两类，在正常细胞内以GDP结合的非活性型存在，两种活性形式之间的转换使他们能

7、够发挥一种类似“分子开关”的作用，活性态的小G蛋白能激活下游的信号传导通路，行使其功能。与Ras基因突变导致其持续激活相似，Rho基因若发生结构改变，使GTP水解发生障碍，而处于持续GTP结合的激活状态，可致其多种功能增强，称为组成型激活突变体，如RhoA(G14V)、RhA(Q63L)等。Rho家族蛋白参与调节了细胞的多种生命过程，包括肌动蛋白的细胞骨架重组、细胞黏附、细胞运动、细胞周期进展、细胞分裂以及基因转录等，已经发现的RhoA的下游效应分子包括ROCK、PKN、Citron及PI．3K等，这些分子介导了Rh

8、oA的作用。因此，小G蛋白被认为是细胞迁移的关键信号蛋白。cAMP是重要的第二信使，蛋白激酶A(ProteinKinaseA，PKA)是cAMP依赖的蛋白激酶，它介导cAMP的信号转导。如PKA在细胞骨架3重庆医科大学硕士研究生学位论文调节和细胞迁移中扮演着重要角色。最近发现，PKA能抑制RhoA的功能。溶血磷脂酸(Lysophosphatid