活化的巨噬细胞对肝癌细胞系细胞迁移的影响.pdf

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1、·4·MedicalLaboratoryScienceandClinics，2013，Vo124，No．6医学检验与临床2013年第24卷第6期doi：10．39696．issn．1673-5013．2013．06．002I活化的巨噬细胞对肝癌细胞系细胞迁移的影响刘宏峰张彩虹朱斌(山东省淄博市中心医院检验科，山东淄博255036)【摘要】目的：探讨肿瘤相关巨噬细胞对肝癌细胞系细胞转移与侵袭力的影响。方法：巨噬细胞加入佛波酯进行刺激培养，体外模拟肿瘤相关巨噬细胞的体内环境，然后把其上清加入肝癌细胞系的transwell

2、小室中去，观察其对肝癌细胞迁移的影响。结果：活化的巨噬细胞上清可对肝癌细胞系的迁移产生明显影响。结论：肿瘤相关巨噬细胞可能参与了肝癌细胞的体内转移过程。【关键词1肿瘤相关巨噬细胞肝癌细胞系转移TheefectofactivatedmacrophagestohepatocellularcarcinomacelllinemigrationLIUHong-~ng；ZHANGCai-hong；ZHUBin(TheclinicallaboratoryofZibocentralhospital，Zibocity，Shandong

3、province，China，255036)[Abstract]Objective：Toinvestigatetheefectsoftumor—associatedmacrophageonmetastasisandinvasiveabilityofhepatoceUularcarcinomacelhnes．Methods：MacrophagesweretreatedwithP／VIAtomimicthetumor-associatedmacrophagesenvironmentinvitro，andthenaddin

4、gthesupernatanttOhepatomacelllinesinthetranswellchamber．toobserveitseffeCtonmigrationofhepatocellularcarcinomacellline．Results：Supernatantofactivatedmacrophageshasasignificantimpactonthemigrationofhepatocellularcarcinomacel1line．Conclusions：Tumor-associatedmacr

5、ophagemaybeinvolvedintheprocessofmetastasisandinvasiveabilityofhepatomacelsinvivo．【KeywordsJTumor-associatedmacrophage，Hepatocelularcarcinomacellfines，Metastasis巨噬细胞是最重要的参与机体肿瘤天然免疫的细1．1．1细胞系胞之一，在传统意义上，它可以通过ADCC等作用直人巨噬细胞系THP一1与人肝癌细胞系BEL7402接杀伤肿瘤细胞，或者通过递呈肿瘤相关抗原然后

6、诱购自中国科学院上海细胞所。导机体产生特异性抗体从而清除肿瘤细胞】。然而，1．1．2主要试剂近年来相关研究表明，肿瘤组织间质中的巨噬细胞胎牛血清购自上海复蒙生物制品公司；PMA、即肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associatedmacrophages，RPMI1640培养基、胰蛋白酶、DMSO为Gibco公司产品。TAM)可能并不是简单地发挥这种单纯的抗肿瘤作用，transwell小室购自Coming公司，matrigel购自sigma(上而是可能参与了肿瘤发生发展包括侵袭和转移的整个海)公司，结晶紫购自朋远公司。

7、过程，国外已经有学者报道其与肿瘤血管生成也密切1-2方法相关口]。因此，研究TAMs在肿瘤发生发展过程中的1．2．1人巨噬细胞的体外活化功能状态和动态变化具有非常重要的临床和科学意义。取对数生长期单核细胞系THP一1，以3"10／肝细胞肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，发病率较孑L的浓度接种于6孔培养板中，加入200nmol／L佛高、社会危害性较大，但是其发生发展特别是侵袭转波酯(PMA)，72h后即可贴壁分化为巨噬细胞。待贴移的确切分子机制至今仍不是非常明确。本研究在体壁后24h收集上清，在transwell试验中代

8、替人肝癌细外用被佛波酯刺激过的人巨噬细胞系THP一1上清与胞系常规培养基。人肝癌细胞系BEL7402共培养，观察其对肝癌细胞转1．2．2人巨噬细胞刺激上清与肝癌细胞在Transwell移与侵袭的表观变化，旨在模拟体内肿瘤微环境并且小室中共培养初步探讨癌症问质细胞对癌细胞的相互影响。1)细胞准备取对数生长期的BEL7402细胞悬液，调整细胞浓1材