CCN5对肝癌细胞系HepG2增殖、迁移和侵袭能力的影响及其作用机制-论文.pdf

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1、2014年3月基础医学与临床March2014第34卷第3期Basic&ClinicalMedicineVo1．34No．3文章编号：1001-6325(2014)03—0376-05研究论文CCN5对肝癌细胞系HepG2增殖、迁移和侵袭能力的影响及其作用机制李海军，孟宪飞，董志意，刘亚峰(榆林市第一医院普通外科，陕西榆林719000)摘要：目的研究CCN5过表达对人肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法以人HepG2细胞为研究对象，构建CCN5过表达载体，转染人HepG2细胞，使CCN5在人HepG2细胞中过表达，分别采用细胞增殖检测试剂盒、Transwell小室法观察其对H

2、epG2细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响；采用Westernblot检测Smad2及p44／42MAPK磷酸化水平。结果CCN5成功在人HepG2细胞中过表达，较对照组、CCN5过表达组，细胞增殖、迁移及侵袭能力相比受到明显抑制(P<0．05)；Smad2及phospho-p44／42磷酸化水平也受到明显抑制。结论CCN5过表达可抑制人肝癌的形成。关键词：CCN5；肝癌细胞；增殖；迁移；侵袭中图分类号：R34文献标志码：AEffectofCCN5onproliferation，migrationandinvasionofhepatomacarcinomacelllineHepG2andthem

3、echanismLIHai-jun，MENGXian—fei，DONGZhi—yi，LIUYa—feng(Dept．ofGeneralSurgery，theFirstHospitalofYulin，Yulin719000，China)Abstract：ObjectiveTostudytheefectofCCN5onproliferation，migrationandinvasionofhepatomacarcinomacellsandthemechanism．MethodsHepatocytehighexpressionsystemofCCN5wasconstructedandtransfe

4、ctedHepG2cellstomakeCCN5overexpression，andthencellproliferationdetectionreagentboxandtranswellchamberwereusedtodeterminetheeffectofCCN5overexpressiononproliferation，migrationandinvasionofHepG2．Tofurtherstudythemechanism，phosphorylationlevelsofSmad2andp44／42MAPKweredetermined．ResultsCCN5wasoverexpre

5、ssedinHepG2cells．Afterthat，theproliferation，migrationandinvasionoftheCCN5overexpressiongroupweresignificantlyinhibited(P<0．05)comparedwiththenormalcontrolgroup．PhosphorylationlevelsofSmad2andp44／42MAPKwerealsosignificantlyinhibited．ConclusionsOverexpressionofCCN5caninhibitpro—liferation，migrationan

6、dinvasionofHepG2．Keywords：CCN5；hepatomac~cinomacell；proliferation；migration；invasion肝癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)具有恶性癌症的6％，是全球第3大致死癌症¨。近年来，尽程度高，易复发、转移、预后差等特点，是最为常见、管肝癌的诊治取得了较大进展，但关于肝癌细胞的恶性程度及死亡率最高的肿瘤之一，占全世界所有增殖、侵袭机制至今尚未完全阐明，肝癌手术切除后收稿日期：2013—05一l6修回日期：2013—09—24通信作者(correspondingauthor)：lihaijunl6

7、1@163．eom李海军CCN5对肝癌细胞系HepG2增殖、迁移和侵袭能力的影响及其作用机制377的复发转移是影响疗效的主要原因之一。因此，肝用于基因克隆的引物序列：CCN5．P2(上游引物：5-癌细胞增殖、侵袭转移这一领域的实验研究不仅有AAAGACTCACAGGTCCGCC-3，下游引物：5-GGACC重要的理论意义，而且有重要的应用价值。ATCTFCCATCAGCC-3)；用于蛋白表达的引物序列：CCN