真姬菇液体发酵工艺优化与发酵产物分析

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1、福建农林大学硕士学位论文成熟时菌柄长3．10cm，直径约0．3．0．6cm，在生长过程中菌盖逐渐由白色变为灰褐色，菌褶近白色I引。真姬菇菌丝体在PDA斜面试管上呈浓白色，边缘为绒毛状，气生菌丝旺盛且爬壁能力强，成熟时色泽变灰。当培养条件不适时，生长速度减慢，菌丝可产生无性孢子。在光学显微镜下观察，单核菌丝直径为1．0-2．09m，细胞狭长，有分隔，少分枝，无锁状联合；双核菌丝直径为2．0．3．09m，细胞狭长，有明显锁状联合【gJ。(2)子实体发育过程在真姬菇子实体发育过程中，根据不同阶段特征可分为5个时期：转色期、菌芽期、钉头期、扁球期和成熟期【sl。转色期是真姬

2、菇发育过程中较为特殊时期，茵丝开始分化，由营养生长进入生殖生长，茵丝由白变灰，在培养料表面形成灰色绒毛，此过程约3d；菌芽期是菌丝开始扭结形成疣状突起，进而发育成瓦灰色针状菌芽的时期，此过程约3．5d；钉头期时针头菌芽生长，顶端细胞分裂形成直径1．3ram针头状菌盖，白色，此过程约3d；扁球期时菌盖逐渐长大，形成扁球状，色泽由自转深，直径1-2cm，菌盖表面出现网状斑纹，菌柄开始生长、增粗，此过程约3—5d；成熟期时菌盖生长速度加快，菌盖逐渐平展，中部增厚，内菌幕破裂，露出片状茵褶，直2．5cm，菇柄迅速伸长，基部开始膨大，直径2．5cm。(3)生长特性真姬菇是一种

3、木生白腐菌，有较强分解木质素、纤维素、半纤维素的能力，能较好地利用葡萄糖、蔗糖和淀粉而不能利用乳糖。在野生条件下，真姬菇的主要营养基质是山毛榉和七叶树等阔叶树木；人工栽培则多利用棉子壳、木屑和玉米芯等各种农林产品下脚料作为碳源，以米糠、麸皮、大豆粉、玉米粉和棉籽仁粉作为氮源，添加微量元素可促进菌丝生长。真姬菇生长的适宜温度是20．2412，适宜的pH范围在6．5．8．0，在不同发育阶段，对培养料和空气湿度要求各不相同：菌丝生长阶段，培养料含水量以65％为宜，空间相对湿度控制在60％为宜；原基形成与分化阶段，培养料含水量以70％为宜，空间相对湿度应提高到85％．95％

4、，如果相对湿度在500／0-60％时，不易形成原基或形成无效原基：子实体生长阶段，空间相对湿度应控制在80％．90％为型91。1．2国内外真姬菇的研究现状1．2．1真姬菇固体栽培的概况真姬菇(Hypsizigusmarmo，．eus)是北温带一种优良的珍稀美味食用菌，是一种很有发展前景的食用菌00]。其人工栽培始于上世纪70年代的日本，主要分布在日本、北美和欧洲等北温带地区，是春秋冬季生木腐菌，主要生长在山毛榉及其他阔叶树的枯木、风倒木和树桩上【lJ。近年来，我国山西、福建、河南、甘肃等省开始引进栽培。真姬菇的栽培方式多为熟料袋(瓶)为载体，根据真姬菇生物学特性进行

5、人工调节，控制适宜真姬菇生长和发育外界条件进行栽培。在室内生产真姬菇产品的过程如下[21：7福建农林大学硕士学位论文菌种扩大培养配制培养料一装袋一灭菌一接种一菌丝吃料_÷生理成熟一上架_开袋催蕾_出菇一采收_+包装_冷藏从以上固体栽培的流程可以看出，真姬菇传统的生产工艺是由母种扩大为二级种、三级种进行自然条件下的栽培模式，其生产周期长(120—150天)，生产成本高，劳动强度大，菌种易老化，商业品质易受温度等外界环境条件影响，使真姬菇品质参差不齐，质量、产量难以控制，效益低，影响其产业化生产。周期长的主要原因是由于一方面采用了传统固体菌种的生产工艺，另一方面是由于真

6、姬菇生理成熟期时间较长。随着我国食用菌生产的迅猛发展，传统的食用菌制种方式已远远不能适应食用菌日益发展的需要。1．2．2真姬菇液体菌种深层培养的研究现状(1)食用菌菌种液体培养概述我国食用菌菌种的生产方式目前主要有两种，一种是采用固体培养，是传统的食用菌菌种生产方式，它指的是利用传统固体原材料如木质、草质的培养料进行食用菌的固体发酵，获得的固体菌种用于栽培从而获得子实体的生产方式。另一种是采用液体培养，它指的是菌种培养基采用液体基质发酵来进行菌种的生产。食用菌的液体培养又称深层发酵、沉没培养或液体发酵，其原理主要是在发酵罐或三角瓶中，采用液体培养基，通入无菌空气并加

7、以搅拌或振荡，增加培养基中的溶氧含量，提供食用菌菌丝体呼吸代谢所需要的氧气，并通过控制适宜的外界条件，使菌体在液体培养基深处繁殖发育以获得大量的菌丝体或发酵的代谢产物的过程【11i。食用菌的液体培养和固体培养相比具有很多的优越性，所以正在慢慢地受到重视112,13】。(2)食用菌液体菌种研究的历史进程液体发酵(即深层培养，Submergedculture)属于现代生物工程技术之～，它是从20世纪40年代中期抗生素工业的兴起而开始的，当时美国弗吉尼亚大学生化工程专家ElmerLGadenJr设计出了培养微生物系统的生物反应器，并成为该技术的权威。后来，这一技术在医