赤霉酸对饲用高效乳酸菌和纤维素分解菌富集培养的影响

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1、赤霉酸对饲用高效乳酸菌和纤维素分解菌富集培养的影响布沙热木•阿布力孜阿依米热・毛拉木乌斯满・依米提新疆大学生命科学与技术学院摘要：研究以赤霉酸对饲料添加菌(乳酸菌:A4和A7;纤维素分解菌:Nf和Y6)富集培养的影响为主要目的而进行。同质量浓度不同添加量的赤霉酸溶液对2株饲料添加菌生长的影响通过生长量和总活菌数的变化来进行研究。试验结果表明:当赤霉酸溶液的添加量为1.0mL时，总活菌数可达11.60亿CFU/mL,与对照组差异显著(P<0.05)。研究对饲料添加菌的富集培养以及为高品质青贮饲料生产提供优势菌株有一定的参考和应用价值。关键词：乳

2、酸菌;纤维素分解菌;富集培养;赤霉酸;作者简介：布沙热木•阿布力孜，硕士，研究方向为资源微生物学。作者简介：乌斯满•依米提，博士，副教授，研究方向为微生物资源开发与利用。通信地址:新疆乌鲁木齐市胜利路666号新疆大学830046收稿日期：2017-10-18基金：国家自然科学基金(31660014)Received：2017-10-18青贮饲料是将植物性原料放置于密闭缺氧条件下贮藏，通过乳酸菌发酵，抑制各种有害微生物的繁殖，形成的饲用发酵产品［1-3］°因此，饲料乳酸菌在生产高品质青贮饲料的过程中具有重要作用因自然条件下，附着于原料中的乳酸菌

3、数量较少，乳酸菌只能通过人工方法来满足卫鹽。研究室前期研究表明,在发酵初期，一定数量的乳酸菌能在很短时间内产生大量的乳酸，有效抑制对饲料有害的微生物的生长，明显提高饲料的发酵品质，但不能提高饲料的消化率［17-⑻。研究室筛选出的纤维素分解菌能够降解饲料中的纤维素，有效提高饲料的消化率，但不能改善饲料的发酵品质［19］。实验室有关人员研究己表明，乳酸菌和纤维素分解菌没有和互抑制作用IM。因此，乳酸菌和纤维素分解菌富集培养的研究可以为高品质青贮饲料牛产提供高效的乳酸菌和纤维素分解菌[21],还能为饲料添加剂生产技术提供有力的试验基础。1材料与方法

4、1.1材料与仪器供试菌种:采用新疆大学生命科学与技术学院饲料研究室分离得到的高效乳酸菌（A4及A7）和纤维素分解菌（Nf及Y6）。培养基：2%蔗糖溶液。赤霉酸:上海同瑞生物科技有限公司（产品标准号:Q31/012000147C001-2015）。分光光度计:型号GoldS54o1.2试验设计1.2.1赤霉酸溶液的配制赤霉酸溶液：1・0g赤霉酸+1000mL蒸憾水。1.2.2试验设计试验设计见表1（n=3）。处理组乳酸菌：纤维素分解菌菌悬液/m对照组1110()试验组111100试验组211100试验组31110()试验组41110()1.3试

5、验方法按照试验设计，每个试验组于37°C条件下培养52h,每4h作一个单位，通过分光光度计（0D6。。）测定生长量并绘制生长曲线。2结果与分析2.1生长量的测定从图1可见，对照组和试验组都在4h后进入生长期，但在后期的整个培养屮,试验组2（赤霉酸溶液的添加量为1.0mL）占优势，并与其他试验组差异显著（P<0.05）o由试验结果可得，赤霉酸溶液添加量为1.0mL对乳酸菌和纤维素分解菌的生长有明显的促进作用。0.000.90i0.80-0.70-0.60-起0.50-g0.40-0.30-0.20-0481216202428323640，时间/

6、h图1混合菌在不同添加量的赤霉酸溶液中的生长曲线下载原图2.2细菌总数的测定混合菌在2%蔗糖溶液中的活菌数测定结果见表2。测定牛长量的同时测定单位时间内的细菌总数，并计算最高菌数。从表3和图2可见，试验组活菌数平均高于对照组，在试验组屮，添加量为l.OmL的赤霉酸溶液屮的活菌数最高，差异明显(P<0.05)o参数活菌数/(亿CFU•ml/)0.85表3混合菌在不同添加量的赤霉酸溶液中的最高活菌数量下载原表试验组赤霉酸溶液的添加量/mL对照组0试验组10.5试验组21.0试验组31.5试验组42.0S12-10-8-6・4・2"011对照组试验

7、组1试验组2图2混合菌在不同添加量的赤霉酸溶液中培养的活菌数下载原图3讨论与结论由试验所得到的活菌数和生长曲线可看出，试验组2（赤霉酸溶液的添加量为1.0mL）的生长量和总活菌数比其他试验组高，其活菌数可达11.60亿CFU/mL,根据牛长量和总菌数也可以看出，试验组2与其他组相比差异显箸（P<0.05）。试验结果与实验室人员美合热阿依•木台力甫等［20］的试验（在2%蔗糖溶液中混合培养）结果（1.62亿CFU/mL）相比有所提高。最近关于饲料乳酸菌富集培养的研究比较多，但是富集培养的乳酸菌含量较低，乳酸菌和纤维素分解菌混合富集培养的研究很少

8、。在实际生产中，菌悬液的需要量大，运输和保藏不便，富集培养法培养的菌悬液由于活菌数含量高，在实际生产中可以减少菌悬液的使用量，降低运输成本，为混合添加菌粉的进--步