鬼针草叶蛋白提取工艺条件的优化试验

《鬼针草叶蛋白提取工艺条件的优化试验》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、鬼针草叶蛋白提取工艺条件的优化试验　　摘要：采用水浴加热、酸化和盐析相结合的方法对鬼针草（Bidensbipinnata）中叶蛋白质进行提取。单因子和多因子正交试验分析了料液比、氯化钠加入量、pH、水浴温度4个因素对叶蛋白的粗蛋白质提取率的影响。结果表明，影响叶蛋白的粗蛋白质提取率的因素依次为料液比>氯化钠加入量>水浴温度>pH，最佳工艺条件为料液比1∶20（g∶mL），氯化钠加入量4%，pH4，水浴温度70℃。　　关键词：鬼针草（Bidensbipinnata）；粗蛋白质；氯化钠；提取工艺　　中图分类号：S567.21+9；R

2、284.2文献标识码：A文章编号：0439-8114（2016）16-4250-03　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.16.045　　鬼针草（Bidens6bipinnata）又名婆婆针，为菊科鬼针草属一年生草本植物。鬼针草营养丰富，蛋白质、微量元素和维生素的含量高，其中粗蛋白质含量高达18.9%，富含17种人体必需的氨基酸；同时鬼针草对生长环境要求低，水湿地均可生长，在西南各省资源量极为可观，因而是一种极具开发价值的叶蛋白资源[1-3]。近年来，随着兽牧业的迅速发展及人均耕地面积

3、的减少，蛋白质资源紧缺现象日益严重，因此国外学者都非常重视叶蛋白（又称植物浓缩蛋白）饲料的生产利用和开发研究，并取得了较大进展。当前用于生产浓缩叶蛋白的主要原料有苜蓿、甘薯、紫云英等[4-9]，而对鬼针草叶蛋白的提取应用的研究还未见报道。本试验利用贵州省黔西南地区丰富的鬼针草资源，采用水浴加热、碱化和盐析相结合的方法[10-13]对叶蛋白的提取工艺进行研究，旨在为鬼针草叶蛋白饲料的开发生产提供参考。　　1材料与方法　　1.1材料　　选择营养生长期鬼针草，于2014年7月23日刈割于贵州省黔西南民族职业技术学院校园附近草地，为自然

4、形成的单一鬼针草丛，收获地上茎叶。刈割的鬼针草风干粉碎后过60目筛，备用。测定鬼针草草粉原料中粗蛋白质含量为17.6%。　　1.2试剂与仪器　　试验试剂有氯化钠、盐酸、氢氧化钠；试验仪器有CP64电子分析天平（上海洪纪仪器设备有限公司）、恒温水浴锅、组织捣碎机（上海汗诺仪器有限公司）、Starter3C酸度计（上海洪纪仪器设备有限公司）、低速离心机、烘箱、K12全自动定氮仪（上海晟声自动化分析仪器有限公司）。　　1.3方法　　1.3.1单因素试验称取鬼针草草粉10g于锥形瓶中，按设定比例加入氯化钠，预浸过夜，抽滤，得到绿色汁液，

5、调节到设定pH，按设定温度水浴加热5min，静置1h，抽滤得叶蛋白膏，65℃烘箱中烘干，得叶蛋白成品。称质量，并测定叶蛋白中粗蛋白质的含量。①设定料液比分别为1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30（g∶mL，下同），加入氯化钠2%，pH为2.0，水浴温度70℃。②氯化钠加入量设定为2%、4%、6%、8%、10%。料液比1∶15，调节pH为2.0，水浴温度70℃。③6pH设定为2.0、3.0、4.0、5.0、6.0。料液比1∶15，加入氯化钠2%，水浴温度70℃。④水浴温度设定为60、70、80、90、100℃。料液比1

6、∶15，加入氯化钠2%，pH为2.0。　　1.3.2正交试验在单因素试验的基础上，为简化试验，以鬼针草蛋白质提取率为标准，对料液比、氯化钠、pH、水浴温度进行四因素三水平正交试验，因素与水平见表1。　　鬼针草草粉和叶蛋白取物中的粗蛋白质含量使用凯氏定氮法测定。3次重复试验，结果取平均值。　　蛋白质提取率=　　■×100%　　2结果与分析　　2.1单因素试验　　由图1可见，料液比对叶蛋白的粗蛋白质提取率的影响变化幅度较大。料液比大于1∶20时，叶蛋白的粗蛋白质提取率随着料液比的减小而增加。料液比小于1∶20时，叶蛋白的粗蛋白质提取

7、率基本上是随着料液比的减少而减少。料液比1∶15、1∶25时叶蛋白的粗蛋白质提取率与料液比1∶20时叶蛋白的粗蛋白质提取率差异显著。当料液比为1∶20时，蛋白提取率最高，达28.72%。6　　由图2可见，氯化钠加入量小于4%时叶蛋白的粗蛋白质提取率随着氯化钠加入量加大而增加。氯化钠加入量大于4%，叶蛋白的粗蛋白质提取率随着氯化钠加入量加大而减少。氯化钠加入量为2%、6%时叶蛋白的粗蛋白质提取率与4%叶蛋白的粗蛋白质提取率差异显著。氯化钠加入量为4%时，叶蛋白的粗蛋白质提取率最高，达26.12%。　　由图3可见，pH为2～4时叶蛋

8、白的粗蛋白质提取率差异不明显。pH为5时，叶蛋白的粗蛋白质提取率显著下降，pH为6时叶蛋白的粗蛋白质提取率回升。当pH为3时，叶蛋白的粗蛋白质提取率较高，为25.14%。　　由图4可见，水浴温度小于70℃时，叶蛋白的的粗蛋白质提取率随着水浴温度的加大而增加。水浴