超声波辅助提取地榆总鞣质工艺的优化

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1、超声波辅助提取地榆总鞣质工艺的优化　　摘要：目的：本文通过正交设计优选地榆总鞣质的超声辅助提取工艺。方法：指标为地榆中总鞣质含量，经过单因素考察以及正交实验对超声辅助提取时间、溶剂浓度、超声辅助提取次数、乙醇溶剂用量四因素进行研究。结果：得到最佳提取工艺为超声波辅助提取3次，每次60分钟，溶剂为15倍量的料液比，浓度为70%的乙醇。结论：通过验证性实验，表明此方法提取工艺稳定可行。　　关键词：地榆;总鞣质;正交设计;超声辅助提取　　中图分类号：R284.2文献标识码：ADOI编号：10.14025/j.cnki.jln

2、y.2016.24.080　　地榆中药材是以植物地榆根入药，最早载于《神农本草经》中。植物地榆（SanguisorbaofficinalisL.）为蔷薇科地榆属植物，为多年生草本，又名猪人参、血箭草、马软枣[1]。地榆属植物大致分布于北温带周围区域，现如今在全世界发现的大概有30多种[2]。我国地榆属植物主要分布在东北、华北、西北、华东、中南及广西[3]。中药地榆其性微寒，酸、涩，味苦、归肝、大肠经。并且具有解毒敛疮，凉血止血之功效，故在中医临床使用上多用于治疗崩漏、血痢、便血、水火烫伤、胃出血、肠炎等病症[4]。地榆

3、属植物中富含黄酮、皂苷、鞣质及甾体类成分。鞣质多具有抗肿瘤[5]、抗氧化[6]及降血脂及降血糖作用[7]等药理活性。本研究对地榆中主要的化学活性成分――6鞣质提取工艺的优化，有利于地榆资源进一步的开发、利用，并为中药材有效成分的富集提供理论依据。　　1仪器、材料　　1.1仪器　　UV-754型紫外―可见分光光度计（上海有一仪器有限公司），HJ-M4磁力搅拌水浴锅（金坛市城西春兰实验仪器厂），R-300旋转蒸发器（瑞士步琦），KQ-250B型超声波清洗器（昆山舒美超声仪器有限公司）。　　1.2材料　　本药材采于吉林省二道

4、乡水库，经过吉林大学药学院王广树教授鉴定，确定本品为药材地榆（SanguisorbaofficinalisL.），没食子酸对照品150毫克（经色谱分析，纯度>98%，济宁宏明化学试剂有限公司）。　　2方法与结果　　2.1测定总鞣质含量[8]　　2.1.1没食子酸标准品溶液的配备精密称定没食子酸标准品25毫克，置于50毫升棕色容量瓶中，加水稀释至刻度，量取10毫升，置于100毫升棕色容量瓶，加水再稀释至刻度，摇匀，放置备用（浓度为0.05毫克/毫升）。　　2.1.2线性关系考察6依次精确量取没食子酸标准品溶液，分别

5、为1毫升、2.0毫升、4.0毫升、6.0毫升、8.0毫升、10.0毫升，再各自置于50毫升容量瓶中，每组均加磷钼钨酸2毫升，加水23毫升、22毫升、20毫升、18毫升、16毫升、14毫升稀释，加29%Na2CO3溶液至刻度后摇匀，放置30分钟，依照（《中国药典》2015年版第四部通则）所述，利用紫外可见分光光度法，在760纳米波长处测定吸光度A，并以吸光度A为纵坐标y，以浓度C为横坐标x，得回归方程y=59.427x+0.0268，r=0.9997。结果表明，没食子酸标准品（1.0～10.0μg/mL）浓度范围内线性关

6、系较好。　　2.1.3供试品溶液称取地榆浸膏适量，充分干燥，称重，置于500毫升容量瓶中，加水300毫升溶解，溶液过夜放置，超声波处理20分钟至充分溶解，于室温下静置冷却，加水稀释至刻度，摇匀静置并滤过，弃去初滤液100毫升，取续滤液20毫升移至200毫升容量瓶中，并加水稀释至容量瓶刻度，充分摇匀，得供试品溶液。　　2.1.4地榆总鞣质含量测定法总酚：量取供试品溶液1毫升，置于50毫升容量瓶中，依“2.1.2项下”方法测定吸光度A，即得。　　未被吸收的多酚：量取供试品溶液30毫升，加入150毫升具塞锥形瓶中，再加入干酪

7、素0.9克，置于30℃水浴下保温1小时，时时振摇，取出之后放冷，摇匀后滤过，并弃初滤液，量取滤液4毫升，置于50毫升棕色容量瓶，依“2.1.2项下”方法测定吸光度，地榆总鞣质的含量计算公式为：M鞣质得含量=M总酚含量-　　M未被吸收的多酚含量　　2.2单因素考察　　2.2.1超声辅助提取的次数取干燥的地榆根粉末适量，加入15B/V的60%C2H5OH，分别提取1、2、3、4、5次，每次60分钟。提取物经测定吸光度，计算含量结果提取次数对的总鞣质的提取量有一定差异，但3、4、5次差异不大，故而选定超声次数1、2、3次作为

8、正交试验考察的因素水平，进一步考察超声辅助提取次数对提取工艺的影响。6　　2.2.2超声辅助提取的时间取干燥的地榆根粉末适量，加入15B/V的60%C2H5OH溶液，并依此超声提取20分钟、40分钟、60分钟、80分钟、100分钟。提取物经测定吸光度，计算含量结果表明20分钟到60分钟提取量逐渐上升，故而选定45分钟，60分钟，7