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1、血晶素对缺氧缺糖海马脑片的保护作用及其分子机制王莉1,余刚2,向德兵3,朱洁2,李光勤21.重庆市肿瘤研究所,重庆400030;2.重庆医科大学附属第一医院神经内科,重庆4000163:第三军医大学大坪医院野战外科研究所病理科,重庆400042摘 要: 目的观察血晶素(Hemin)对海马脑片氧糖剥离(OGD)模型的保护作用并探讨其机制。方法:取新生8-10dSD大鼠,制备厚约400μm海马脑片,培养2周后筛取完好无特异荧光着色的脑片,分为正常培养对照组(HOTC),缺氧缺糖组(OGD),预加Hemin再缺氧缺
2、糖组(Hemin+OGD),预加血红素加氧酶-1(hemeoxygenase-1,HO-1)抑制剂锌原卟啉(Znpp)再缺氧缺糖组(Znpp+OGD)。除HOTC组外,其余各组在5%CO2、95%N2的混合气体中培养1.5h,其后恢复培养24h。海马脑片冰冻连续冠状切片,应用免疫组织化学染色和图像分析处理技术观察海马脑片脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)和HO-1表达变化,并观察神经元形态学改变。结果:海马脑片发生缺氧缺糖时,神经元中Ngb蛋白和HO-1蛋白表达增加,血晶素促进神经元Ngb蛋白和HO-
3、1蛋白表达,并减轻海马脑片缺糖缺氧性损伤。Znpp抑制神经元Ngb蛋白和HO-1蛋白表达,并加重海马脑片缺糖缺氧性损伤。结论:血晶素可减轻海马脑片缺糖缺氧性损伤,其机制可能通过诱导HO-1表达从而增加神经元Ngb表达发挥作用。关键词:海马脑片;缺氧缺糖;脑红蛋白;血红素加氧酶-1;血晶素中图法分类号:R741.02文献标识码:ANeuroprotectiveeffectofheminanditsmolecularmechanisminthehippocampalorganotypictissueculture
4、saftercombinedoxygen/glucosedeprivationWANGLi1,YUGang2*,XiangDe-bing3,ZHUJie,LiGuang-qin(1:DepartmentofMedicalOncology,Chongqingcancerinstitute,400030;2:DepartmentofNeurology,TheFirstAffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity,400016;3:DepartmentofPathol
5、ogy,DapingHospitalandResearchInstituteofSurgery,ThirdMilitaryMedicalUniversity,400042;Chongqing,China)基金项目:国家自然科学基金资助项目(30500170)SupportedbytheNationalNatrualScienceFoundationofChina(30500170)作者简介:王莉(1974-),女,四川省合江人,博士,主治医师,主要从事信号传导方面的研究,发表论文10余篇。通讯作者:余刚,重庆
6、医科大学附属第一医院神经内科,邮政编码:400016电话:(023)890120089Abstract:ObjectiveToinvestigatetheneuroprotectiveroleofheminanditseffectontheexpressionofneuroglobin(Ngb)andhemeoxygenase-1(HO-1)inthehippocampalorganotypictissuecultures(HOTC)aftercombinedoxygen/glucosedeprivation
7、(OGD).MethodsSDrats,8~10-daysold,weresacrificedforbrain.HOTCweremadeandrandomlydividedintofourgroups:HOTC,HOTCundergoingOGD(OGD),HOTCundergoingOGDfollowingpretreatmentwithhemin(Hemin+OGD);HOTCundergoingOGDfollowingpretreatmentwithZnpp(Znpp+OGD).Theexpressio
8、nofneuroglobinandHO-1wasdetectedbyimmunohistochemicaltechniqueandcomputer-assistedimageanalysis.ResultsInOGDgroup,hippocampalorganotypictissuelostnormalstructureandneuronsweredamagedseverely,andtheexpr