氧化槐定碱对缺糖缺氧再灌注损伤的新生大鼠海马神经细胞的保护作用及机制研究

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1、分类号：R3单位代码：10752密级：公开学号：2009049宁夏医科大学硕士研究生学位论文氧化槐定碱对缺糖缺氧再灌注损伤的新生大鼠海马神经细胞的保护作用及机制研究NeuroprotectiveeffectsanditsmechanismofOxysophoridineonrathippocampalneuronsinjuredbyoxygen-glucosedeprivationandreperfusion学位申请人：赵靖指导教师：余建强合作指导教师：申请学位门类级别：医学专业名称：药理学研究方向：神经药理学所在学院：药学

2、院论文完成日期：二○一二年四月宁夏医科大学研究生院NingxiaMedicalUniversityThesisforApplicationofMaster’sDegreeNeuroprotectiveeffectsanditsmechanismofOxysophoridineonrathippocampalneuronsinjuredbyoxygen-glucosedeprivationandreperfusionStudent’sName:ZhaoJingSupervisor:YuJianqiangAssistantsup

3、ervisor:SubjectCategory:MedicineMajor:PharmacologySpecialty:NeuropharmacologySchool:CollegeofPharmacyCompletionDate:Apr.2012宁夏医科大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式

4、标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名＿＿＿＿＿论文导师签名＿＿＿＿＿年月日年月日宁夏医科大学关于学位论文使用授权的声明宁夏医科大学有权保留使用本人学位论文，同意学校按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权宁夏医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名＿＿＿＿＿论文导师签名＿＿＿＿＿年月日年月日宁夏医科

5、大学硕士研究生学位论文中文摘要氧化槐定碱对缺糖缺氧再灌注损伤的新生大鼠海马神经细胞的保护作用及机制研究摘要目的观察氧化槐定碱（Oxysophoridine，OSR）对原代培养的新生大鼠海马神经细胞缺糖缺氧再灌注损伤的保护作用，并初步探讨OSR对原代培养的新生大鼠海马神经细胞缺糖缺氧再灌注损伤的保护作用的可能机制。方法1.以原代培养的新生大鼠海马神经细胞为研究对象，用无糖培养液结合物理性缺氧建立缺糖缺氧再灌注损伤模型。2.MTT法测定神经细胞存活率、化学比色法测定神经细胞乳酸脱氢酶（LDH）漏出率以及激光共聚焦技术测定神经细胞

6、内线粒体膜电位（Mitochondrialmembranepotential，MMP）水平的变化。3.化学比色法测定神经细胞培养液中谷氨酸（Glu）的含量。Westernblot方法和实时荧光定量PCR技术检测大鼠海马神经细胞NMDA受体NR1亚基蛋白2+和mRNA的表达。激光共聚焦技术测定神经细胞内游离钙离子浓度（[Ca]i）的变化。化学比色法测定神经细胞内丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）、一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）水平的变化。结果1.与正常

7、组相比，缺糖缺氧再灌注损伤模型组可显著降低神经细胞的存活率（P＜0.01），提高乳酸脱氢酶的漏出率（P＜0.01），降低神经细胞内线粒体膜电位的荧光比值（P＜0.01）。2.与模型组相比，氧化槐定碱治疗组（20、5、1.25mg/L）可显著提高大鼠海马神经细胞的存活率（P＜0.01），降低乳酸脱氢酶的漏出率（P＜0.05，0.01）。氧化槐定碱治疗组（20、5mg/L）与模型组相比，可明显提高神经细胞内线粒体膜电位的荧光比值（P＜0.05，0.01）。I宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要3.与模型组相比，氧化槐定碱治疗组

8、（20、5、1.25mg/L）可以减少神经细胞培养液中谷氨酸的含量（P＜0.05，0.01）。氧化槐定碱治疗组（20mg/L）与模型组相比，可明显抑制NMDA受体NR1亚基蛋白和mRNA的表达（P＜0.05，0.01）。4.与模型组相比，氧化槐定碱治疗组（20、5、1.25mg/L）可减少