白血病细胞雌激素受体多个启动子甲基化的实验研究

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1、白血病细胞雌激素受体多个启动子甲基化的实验研究姚婕张晓兵王珏府伟灵(第三军医大学西南医院检验科,重庆400038)摘要:目的检测白血病细胞雌激素受体(ER)基因启动子区CpG岛甲基化状态情况,探讨雌激素受体基因多个启动子区包括ERa(ERa-A,-Band-C)和ERb甲基化与其表达异常的联系。方法应用RT-PCR检测6种白血病细胞株以5′-杂氮-2-脱氧胞苷(5′-Aza-Dc)去甲基化前后ER基因表达活性并应用甲基化特异性PCR技术(methylationspecificPCR,MSP)检测10例正常人白细胞和6种白血病细胞株以5′-Aza-Dc去甲基化

2、前后ER基因甲基化状态。结果ER各启动子在白血病细胞株中均出现甲基化或半甲基化带,但只有ERα-A基因表达沉默而且在正常人白细胞中呈未甲基化状态,在以5′-Aza-Dc处理细胞株后ERα-A基因表达恢复。结论白血病细胞的雌激素受体基因启动子区存在高甲基化现象并导致其基因表达沉默,可能为白血病的致病机制分析提供了一个新的方向,提示ERα-A基因启动子CPG岛的甲基化有可能成为白血病的新的参考标记物。关键词:白血病;雌激素受体基因;DNA甲基化;启动子Methylationprofileofestrogenreceptorpromotersgeneinleuke

3、miacells基金项目:国家自然科学基金(30600264),重庆市自然科学基金(2006BB5382)SupportedintheNationalNatureScientificFoundationofChina(30600264)andtheNatureScientificFoundationofChongqing(2006BB5382)作者简介:姚婕(1976-)女,四川安岳县人,博士研究生,实验师,主要从事DNA甲基化方面研究。电话:(023)65460801通讯作者:府伟灵,电话:(023)68754429,E-mail:weilingfu@ya

4、hoo.comYAOJie,ZHANGXiao-Bing,WANGJue,FUWei-ling(DepartmentofLaboratoryMedicine,SouthwestHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing40038,China)Abstract:ObjectiveToinvestigatethemethylationstatusofpromoterCpGislandsoftheestrogenreceptors(ERs)inleukemiacelllines,including3promo

5、tersofERa(ERa-A,-Band-C)and1promoterofERb,andexplorethepossiblerelationshipbetweenthemRNAexpressionsofthepromotersandtheCpGmethylation.Methods:WithRT-PCRandmethylationspecificPCR(MSP),themRNAexpressionsofabovepromotersandtheirstatusofmethylationinleukemiacelllinesHL-60,K562,Jurkat,

6、THP-1,U937andMOLT-410,andhealthcontrolswithorwithouttreatmentof5-aza-2'-deoxycitidine(5-aza-dC).Results:PromotersofERwereallmethylatedorsemi-methylatedinthe6strainsofluekemiacells.OnlytheERa-Awasinactivatedintheseleukemiacelllinesandwasunmethylatedinall10healthcontrols,andtheexpres

7、sionwasrecoveredafterthetreatmentof5’-aza-dC.Conclusion:TheCpGislandsofERpromoterarehypermethylatedin6strainsofleukemiacells,andthisinactivatetheexpressionofERa-A,whichcanbeactivatedbythetreatmentof5’-aza-dC.Keywords:leukemia;estrogenreceptor;DNAmethylation;promoter性激素受体是类固醇受体之一,通过

8、信号传递途径调控细胞的增殖分化,随着DNA甲基化与肿

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