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时间:2019-03-06
《雌激素及雌激素受体α对谷氨酸诱导神经细胞损伤的作用研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、«中国图书资料分类法»分类号:R741单位代码:10660学号:S100158贵阳医学院2013届临床医学硕士专业学位材料(临床论文部分)雌激素及雌激素受体α对谷氨酸诱导神经细胞损伤的作用研究研究生:张广云导师:王建怡教授年级:2010级专业:儿科学2013年5月18日目录摘要.....................................................1缩略词表..................................................3前言..............................................
2、.......5第一部分谷氨酸诱导神经细胞损伤模型的构建及鉴定1、前言..................................................72、材料与方法.............................................83、结果.................................................124、讨论.................................................15第二部分雌激素及雌激素受体α对谷氨酸诱导神经细胞损伤的保护作用1、前言............
3、.....................................162、材料与方法............................................173、结果.................................................264、讨论.................................................33结论....................................................36参考文献..................................
4、...............37致谢....................................................42英文摘要.................................................43论文原创性声明...........................................45综述....................................................46附:临床能力考核有关材料:贵阳医学院2013届硕士研究生论文临床轮转考核表(按时间顺序)学术活动情况表(按时间顺序)临床
5、能力考试及学位答辩情况表贵阳医学院2013届硕士研究生论文雌激素及其受体α对谷氨酸诱导神经细胞损伤的作用研究专业名称:儿科学研究生:张广云导师:王建怡教授摘要目的建立谷氨酸(GlutamateGlu)诱导的神经细胞损伤模型,观察雌激素及雌激素受体a(EstrongenreceptoraERa)对谷氨酸诱导神经细胞损伤的保护作用,分析其可能作用机制,希望为进一步认识神经系统相关疾病的病理生理过程提供理论依据,并为相关领域的治疗提供新的思路。方法原代培养皮层神经细胞,神经元特异性烯醇化酶(Neuronspecificenolase,NSE)免疫组化染色方法鉴定神经元的纯度。建立Glu诱导的
6、神经细胞损伤模型,通过检测细胞乳酸脱氢酶(Lactatedehydrogenase,LDH)漏出率以及细胞凋亡率,鉴定该损伤模型。用前期试验中已构建成功的ERα重组慢病毒(V-ERa-RFP-flag),感染Glu诱导的神经细胞损伤模型,实时荧光定量PCR和westernblot方法检测ERα转录和蛋白相对表达水平。实验分为3组:①对照组:空慢病毒(V-RFP-flag)感染Glu诱导的神经细胞损伤模型;②雌激素组:雌激素干预Glu诱导的神经细胞损伤模型;③慢病毒组:V-ERa-RFP-flag感染Glu诱导的神经细胞损伤模型。通过流式细胞仪(Flowcytomety,FCM)、酶标仪
7、分别检测各组神经细胞凋亡率、LDH漏出率以及Caspase3活性,观察对比神经细胞损伤程度;实时荧光定量PCR及免疫荧光法检测各组神经细胞中N-甲基-D-天氡氨酸受体1(N-methyl-D-asprtatereceptor1,NMDAR1)及Ⅰ型囊泡膜谷氨酸转运体(VesicularGlutamateTransporteroftype1,VGLUT1)变化。结果成功原代培养神经细胞,经NSE免疫组化方法鉴定神经元纯度大于90%。Glu诱导的神
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