htert,sirna抑制胆囊癌细胞端粒酶活性及增殖运动的研究

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1、从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果hTERT,siRNA抑制胆囊癌细胞端粒酶活性及增殖运动的研究作者:丁昂 童赛雄 冯平 秦新裕【摘要】  [目的]探讨hTERT,siRNA对GBC,SD端粒酶活性、琥珀酸脱氢酶活性、侵袭、hTERTmRNA、hTERT蛋白的作用及其相关机制。[方法]在质粒pGCsi,H1/GFP,hTERT干扰后,采用端粒酶TRAP、半定量RT,PCR和Westernblot方法检测GBC,SD端

2、粒酶活性、hTERT基因和β,catenin基因mRNA、蛋白质表达水平。四甲基偶氮唑盐光吸收法检测SDH活性,运用Transwell小室了解癌细胞侵袭情况。[结果]pGCsi,H1/GFP,hTERT对GBC,SD端粒酶活性、SDH活性、侵袭、hTERTmRNA、hTERT蛋白均有抑制作用并随浓度升高而增强。pGCsi,H1/negative对上述指标无明显抑制作用,与pGCsi,H1/GFP,hTERT抑制作用比较差异有统计学意义。[结论]pGCsi,H1/GFP,hTERT通过降低hTERTmRNA及蛋白表达

3、降低,进而抑制端粒酶、SDH活性及其侵袭力。【关键词】胆囊肿瘤 RNA干扰 基因 蛋白质 hTERT β,cateninInhibitoryEffectofhTERT,siRNAonTelomeraseActivityCellProliferationandMigrationinGallbladderCancerCells课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便

4、于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果.HuaianForthHospitalofSuzhouMedicalCollege,Huaian23300,China)Abstract:[Purpose]ToexploretheofhTERT,siRNAeffectonGBC,SDcelltelomeraseactivity,SDHactivity,invasionefficiency,hTERTmRNAandhTERTprotEinandthEIrmechanisms.[Methods]Telomerasea

5、ctivity,mRNAandproteinofhTERTandβ,catenininGBC,SDweredetectedbytelomeraseTRAP,RT,PCRandWesternblottechniques,respectively;SDHactivity,byMTT;andinvasionassaybyTranswellchamberafterGBC,SDcellswereinterferedinpGCsi,H1/GFP,hTERTvector.[Results]pGCsi,H1/GFP,hTERTco

6、uldinhibitGBC,SDcelltelomeraseactivity,SDHactivity,andinvasionefficiency,expressionofhTERTmRNAandprotein.TheinhibitioneffectwascorrelatedwithincreaseofpGCsi,H1/GFP,hTERTvectorconcentrations.pGCsi,H1/negativevectorhadnoinhibitiononaboveindexes.Astatisticallysig

7、nificantdifferenceexistedbetweenpGCsi,H1/GFP,hTERTvectorandpGCsi,H1/negativevector(PKeywords:gallbladderneoplasms;RNAinterference;gene;protein;hTERT;β,catenin课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生

8、提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果β,catenin与胆囊的恶性病变密切相关,端粒酶、hTERT、β,catenin在人胆囊癌细胞系呈阳性表达,其中,hTERT在胆囊癌中阳性表达率为%,它们可提示胆囊癌细胞的生物学特性,影响胆囊癌细胞的增殖、运动和侵袭力[2,3],因此,以hTERT为靶点,对胆囊癌细胞的体外干预研究将有助于为胆囊癌的治疗提供一条新途

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