连续温度变化对葡聚糖酶酶解酵母葡聚糖地影响

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1、实用标准文案连续温度变化对β-1,3-葡聚糖酶酶解酵母β-葡聚糖的影响摘要:为了探索反应温度对产物组分的影响,利用自制连续变化的温度梯度实验装置,研究了22℃~60℃(±0.1℃)区间内温度对一内切β-1,3-葡聚糖酶酶解酵母β-葡聚糖的影响,获得了酶解过程多点温度特性数据。分析表明:该酶酶解酵母β-葡聚糖的活化能为84.17kJ/mol;以产物积累表示的最适酶解温度随时间延长呈指数下降;酶解产物组分受温度的影响,低温较高温获得的寡糖链长,高温区大于46℃可以获得以昆布二糖、昆布三糖为主的组分,而低温区小于30℃可以获得昆布五糖及

2、更大分子量的产物。研究结果可为寡糖生产提供精确的温度控制参数。关键词:温度梯度,β-1,3-葡聚糖酶,水解,β-1,3-D-葡寡糖Effectofcontinuoustemperaturechangeonhydrolyticproductsofyeastβ-glucanbyendo-β-1,3-glucanaseAbstract:Inordertoexploretheinfluenceofreactiontemperatureontheproductcomposition,theeffectofcontinuoustemperat

3、urechange(22°C−60°C,±0.1°C)onhydrolysisofyeastβ-glucanbyendo-β-1,3-glucanasewasdeterminedbyusingself-developedBiochem-temperatureCharacteristicApparatus.Theactivationenergyofenzymatichydrolysisofyeastβ-glucanwas84.17kJ/mol.Theoptimumtemperaturerepresentedbyaccumulatio

4、nofproductsdecreasedexponentiallywithinacertainperiodoftime.Thecomponentsoftheproductswerechangedwithreactiontemperature.Thelengthofoligosaccharidesdecreasedwiththeincreaseoftemperature.Themainproductswerelaminaribioseandlaminaritrioseatthetemperaturehigherthan46°C,wh

5、ilethemainproductswerelaminaripentaoseandlargermolecularweightcomponentsatthetemperaturelowerthan30°C.Theresultscanprovidepreciseparameterstocontrolthereactiontemperatureoftheproductionof1,3-β-D-glucooligosaccharides.段峰等:连续温度变化对β-1,3-葡聚糖酶酶解酵母β-葡聚糖的影响1093Journals.im.ac

6、.cnKeywords:temperaturegradient,endo-β-1,3-glucanase,hydrolysis,1,3-β-D-glucooligosaccrides温度是生命环境的重要因素之一,是生命科学研究工作中必须控制的首要条件。研究温度对生命体生长繁殖的影响,以及温度对生物酶反应的效率等是生命科学研究领域中的一个关键内容。目前实验室所用恒温装置主要是空气浴、水浴形式,对温度的控制为一室一控。在一个恒温装置中进行一次实验只能获得一个温度点的特性数据,欲完成一条温度特性曲线的完善描述,还需要多次实验才能完精彩文

7、档实用标准文案成,由于多次实验要受到环境条件、仪器稳定性、试剂配制、操作手法等不确定性因素干扰,所得各温度点的数据不适合温度特性研究工作。综观已报道的温度对微生物生长和产物形成过程分析的报告,都是依据上述温度梯度试验结果而作出的,通常都是相隔5℃和温差±1℃下得到的,由此可见一个确切的温度影响的动力学过程是难以得到的,特别是对于“转折点”的判断会造成显著误差,而这又是微生物生理学和生物工程学上的重要参数。早在1958年,Halldal和French开始利用金属铝板产生温度梯度,在其上铺琼脂介质支持海藻生长,并利用水槽、毛玻璃、纸梳

8、形成光照梯度,进行温度与光照两个因素对海藻生长影响的研究[1]。后来有许多研究者改进或自行设计新型温度梯度装置进行温度特性的相关研究工作。Thompson利用自制“温度梯度栅”研究了温度对野生植物种子的发芽影响与其对自身生长环境适应性的关系[2];

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